Papel da degradação de proteínas dependente do ER via proteasoma (ERAD) nos mecanismos iniciais de ativação da NaD (p)H oxidase: interação com a dissulfeto isomerase protéica

• Processo: 04/13583-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2005
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2009
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
• Pesquisador responsável: Francisco Rafael Martins Laurindo
• Beneficiário: Angélica Mastandréa Amanso
• Instituição Sede: Instituto do Coração Professor Euryclides de Jesus Zerbini (INCOR). Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da USP (HCFMUSP). Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 00/12154-2 - Fisiologia molecular da sinalização redox no sistema vascular e modelos de células em cultura, AP.TEM
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Dissulfeto Isomerase Proteica | Estresse Oxidativo | Had(P)H Oxidase | Proteasoma

Resumo

Mecanismos reguladores da NAD(P)H oxidase vascular, a principal fonte de espécies reativas de oxigênio, não estão claros. Mostramos que a dissulfeto isomerase proteica (PDI), uma chaperona do retículo endoplasmático (RE), interage com a NAD(P)H oxidase de células musculares lisas. Estresse do RE, que resulta do acúmulo de proteínas mal-enoveladas, leva à super-expressão e translocação para a membrana da PDI. Mostramos que a interação PDI-oxidase acopla o estresse do RE ao estresse oxidativo. Uma resposta celular que coopera com a adaptação ao estresse do RE é a degradação de proteínas via proteasoma (ERAD). Nossa hipótese é que a ERAD possa ser uma das vias pelas quais o estresse do RE se acopla ao estresse oxidativo, sendo assim um dos eventos precoces da ativação da NAD(P)H oxidase, em provável cooperação com a PDI. Os objetivos deste projeto são: 1)Estudar o efeito da inibição do proteasoma na atividade da NAD(P)H oxidase vascular desencadeada por estresse do RE ou o ativador clássico angiotensina II. Serão abordados o perfil das subunidades da oxidase que se associam à PDI e localização subcelular destas subunidades (confocal); 2) Estudar o papel da inibição do proteasoma na sinalização redox celular secundária ao estresse do RE por homocisteína; 3) Investigar a ocorrência e perfil de fosforilação da PDI secundária à ativação da NAD(P)H oxidase e estresse do RE; 4) Investigar a ocorrência e possíveis conseqüências da associação entre PDI e a ubiquitina ligase HRD-1 (responsável pela degradação de proteínas pelo ERAD). (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

AMANSO, Angélica Mastandréa. Inibição do proteasoma aumenta o estresse oxidativo e bloqueia a resposta da NADPH oxidase a estímulos em células musculares lisas vasculares. 2009. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Medicina (FM/SBD) São Paulo.