Estudos sobre a estrutura e organização das extremidades cromossomi CAs de Trypanosoma cruzi com ferramentas de bioinformática, cromossomo artificial e radiação ionizante

• Processo: 04/15299-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2005
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2010
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: José Franco da Silveira Filho
• Beneficiário: Roberto Rudge de Moraes Barros
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 02/13705-8 - Bases moleculares da infecção pelo Trypanosoma cruzi: análise dos mecanismos envolvidos e comparação das duas linhagens filogenéticas distintas do parasita, AP.TEM
• Assunto(s): Variação antigênica Parasitos Trypanosoma cruzi
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Minicromossomos Artificiais | Parasitas Transgenicos | Recombinacao Ectopica | Telomeros | Trypanosoma Cruzi | Variabilidade Antigenica

Resumo

A proposta é identificar os mecanismos genéticos envolvidos na geração de variabilidade antigênica das proteínas de superfície GP85 de Trypanosoma cruzi. A variação antigênica nos protozoários parasitas Trypanosoma brucei, Plasmodium falcíparum e Giardia lamblia ocorre pela recombinação ectópica entre genes localizados nas extremidades cromossômicas. No caso do T. cruzi demonstramos que as regiões subteloméricas são ricas em (pseudo)genes GP85 e retrotransposons, sugerindo que elas possam ser sítios de recombinação e geração de novas variantes da família. Pretendemos demonstrar a existência de recombinação entre os membros subteloméricos da família GP85 por transfecção com um minicromossomo artificial de T. cruzi (pTAC) construído pelo grupo do Dr Mariano Levin (Argentina). As regiões subteloméricas de T. cruzi serão subclonadas em pTAC juntamente com um gene repórter. Formas epimastigotas do T. cruzi serão transfectadas com pTAC e a descendência examinada por diferentes técnicas moleculares. O aspecto original da proposta consiste na aplicação de uma nova tecnologia de biologia molecular (construção de cromossomos artificiais) no estudo de um importante aspecto da biologia do protozoário T. cruzi que é a variabilidade antigênica. Recordamos que o T. cruzi é refratário às outras tecnologias tais como: nocaute gênico, RNA de interferência. (AU)