Análise da estrutura tridimensional da L-aminoácido oxidase de Bothops atrox e suas interações in vitro e in vivo

Resumo

As toxinas animais são capazes de comprometer o ciclo de determinadas atividades biológicas como apoptose, ciclo celular, inflamação, necrose tecidual, requerendo assim estudos mais aprofundados para o entendimento desses mecanismos. Tendo em vista estas informações, o presente projeto tem como objetivo investigar a ação da proteína LAAOBatrox nas linhagens tumorais Jurkat, B16F10 e PC12 de forma que a ação desta proteína em células normais não de mostrou atividade tóxica relevante. Para tanto, utilizaremos parâmetros de análise na indução de células apoptóticas por citometria de fluxo e técnicas de fluorescência, além da inibição de substâncias como H202 que possivelmente sejam responsáveis pelas ações apoptóticas. Em outra abordagem, serão realizados tratamentos in vivo com a LAAOBatrox em animais estimulados com as linhagens tumorais, verificando as vias de atuação (p53) e reparo de DNA, ciclo celular, produção de anticorpo monoclonal para verificação da possibilidade de um receptor ligante e local da ligação, além de avaliar seu efeito como agente bactericida, fungicida e leishmanicida. Para caracterização estrutural, a LAAOBatrox será analisada em métodos de cristalografia para melhor entendimento estrutural desta proteína. Estes dados favorecerão o desenvolvimento de estratégias terapêuticas mais direcionadas. (AU)