Caracterização bioquímica da paracoccina de Paracoccidioides brasiliensis

Resumo

Paracoccidioides brasiliensis é o agente etiológico da Paracoccidioidomicose, a micose profunda de maior prevalência na América Latina. Dentre os fatores próprios do fungo capazes de aumentar sua patogenicidade são mencionados lipídeos, polissacarídeos e glicoproteínas. Uma lectina de P. brasiliensis denominada paracoccina (70 kDa), com afinidade por N- acetil-glicosamina, foi identificada e localizada na superfície celular de leveduras. Essa lectina contribui para a adesão do fungo à matriz extracelular e induz macrófagos a produzir JHF-a e oxido nítrico em altas concentrações. Tais características justificam o investimento de esforços em sua caracterização bioquímica detalhada, através do cumprimento das seguintes metas: (1) investigação de atividade quitinolítica e de N-acetil-β-D-glicosaminidase; (2) otimização de sua purificação por afinidade a anticorpos específicos; (3) caracterização por eletroforese bidimensional e imunoblotting; (4) seqüenciamento polipeptídico com análise da seqüência de peptídeos tripsínicos por espectrometria de massa, (5) determinação da estrutura tridimensional da proteína recombinante; (6) analisar a ligação de paracoccina à superfície de macrófagos e avaliar cíneticamente o processo de internalização da lectina. O cumprimento dessas metas abrirá perspectivas para o estabelecimento da relação estrutura-função da molécula paracoccina e para o esclarecimento da correlação entre a sua expressão e a virulência de P. brasiliensis. (AU)