Caracterização do fosfoproteoma, proliferação e migração de linhagens celulares derivadas de glioblastoma estimuladas por EGF

Resumo

Glioma é um dos tipos mais comuns de tumor primário no SNC adulto. É classificado em quatro graus, dos quais o glioblastoma multiforme (GBM), grau IV, é o mais agressivo, com média de sobrevivência de até um ano. Surge como conseqüência da desregulação de inúmeras vias de sinalização intracelular, que capacitam as células à proliferação celular aumentada, resistência a apoptose e perda de aderência e migração. Entre estas vias de sinalização estão aquelas ativadas pelo receptor do fator de crescimento epidermal (EGFR), que pertence a uma família de receptores tirosina-quinases relacionada a cascatas de sinalização intracelular que modulam a proliferação, sobrevivência, adesão, migração e diferenciação celular. O presente projeto de pesquisa pretende caracterizar fosfopeptídeos presentes nas proteínas que participam ou interagem nas vias de sinalização celular ativadas por EGFR e avaliar as mudanças do padrão de fosforilação em resposta ao estimulo por EGF, quanto à proliferação e migração celular nas linhagens celulares T98G e U87MG derivadas de glioblastoma secundário e primário, respectivamente. Para isso, serão realizados experimentos de cultivo celular sincronizado, ensaios de proliferação e migração, caracterização do fosfoproteoma através de imunoprecipitação e cromatografia de afinidade por metais (IMAC) e espectrometria de massa LC - ESI-MS/MS. Tendo em vista a importância das vias de sinalização ativadas por EGFR no desenvolvimento de glioma, o conhecimento dessas vias poderá contribuir para um melhor entendimento do processo biológico envolvido na progressão tumoral e um melhor entendimento da doença com possível caracterização de novos alvos para a intervenção terapêutica. (AU)