Estudos estruturais das NEK quinases de Leishmania braziliensis.

Resumo

Proteínas quinases são mediadores chave de tradução de sinais, transmitindo interpretações do ambiente e coordenando processos intracelulares. De particular interesse entre as serina/treonina quinases de tripanosomatídeos está à família das Neks, envolvidas em diversas funções celulares. Seu grande número em tripanosomatídeos sugere que algumas podem ter funções únicas nesses organismos. Os tripanosomatídeos podem ser parasitas tanto de animais invertebrados ou vertebrados e algumas espécies são agentes etiológicos de doenças humanas que representam um problema de saúde pública em países tropicais, como Doença de Chagas, causada pelo Trypanosoma cruzi, e Leishmaniose, causada pelos parasitas do gênero Leishmania. Embora o papel das Nek quinases seja de amplo interesse, pouco é conhecido sobre o mecanismo básico em protistas. Como as proteínas quinases estão envolvidas diretamente na proliferação e/ou viabilidade dos estágios do ciclo de vida dos parasitas, cabe seu estudo como possíveis alvos de drogas. Entretanto, os fármacos atualmente em uso foram desenvolvidos há décadas, apresentam efeitos colaterais sérios e resistência por vários pacientes, indicando a necessidade urgente para o desenvolvimento de novas substâncias eficazes, baratas e seguras para o tratamento de leishmanioses e doença de Chagas. Assim, este projeto tem como objetivos caracterizar estruturalmente por métodos cristalográficos e biofísicos bem como selecionar potenciais inibidores para NEK quinases de L. braziliensis. Essas informações ao nível atômico são essenciais para um melhor entendimento das funções fisiológicas e mecanismos das NEK quinases nos parasitas e estritamente necessárias para estudos de busca e desenho de fármacos. Abordagens high-throughput como fluorometria diferencial de varredura (DSF) serão utilizadas na busca de potenciais ligantes e ferramentas analíticas como cinética enzimática e calorimetria de titulação isotérmica para caracterização das interações. Uma vez identificado ligantes promissores estes serão levados à triagem in vitro e in vivo para a avaliação do efeito dessas drogas no parasita.