Interação funcional entre o sistema colinérgico e adrenérgico na manutenção da massa muscular e da placa motora

Resumo

Embora estudos prévios têm demonstrado papel importante da sinalização mediada pelo AMPc no controle da estabilização dos receptores nicotínicos (AchRs) na junção neuromuscular, os reguladores fisiológicos desta via permanecem desconhecidos. Recentemente, demonstramos que o Sistema Nervoso Simpático (SNS) tem um papel importante no controle do metabolismo de proteínas em músculo esqueléticos através da ativação de receptores ²2-adrenérgicos e da sinalização do AMPc/PKA. Desta forma, nós hipotetisamos que além dos efeitos protetores na massa muscular, o SNS possa mediar a estabilização dos AchRs na placa motora. Para isto, camundongos serão tratados com clembuterol, um ²2-agonista seletivo e a cinética da meia-vida do AChR in vivo após a aplicação de 125I-±-bungarotoxina (usando os músculos inervados e desnervados) será analisada. Adicionalmente, as imagens in vivo das sinapses da junção neuromuscular serão obtidas. Para esclarecer os mecanismos moleculares relacionados a estes efeitos, será quantificada a atividade da PKA, o conteúdo de AMPc, assim como a expressão de genes e proteínas relacionadas à atrofia (atrogina-1 e MuRF1) e autofagia (LC3 e GABARAP). Em paralelo, os níveis de fosforilação da Akt, uma proteína chave no controle do metabolismo de proteínas, serão estimados. Também será objetivo deste estudo elucidar o papel da inervação colinérgica no metabolismo de proteínas musculares. Após adição de agonistas colinérgicos em meio contendo músculos isolados de ratos, serão medidas as atividades dos diferentes sistemas proteolíticos e as taxas de síntese proteica, na presença ou ausência de ²2-agonistas. Estes resultados contribuirão para a melhor compreensão da interação funcional entre o sistema colinérgico e adrenérgico na manutenção da massa muscular e da placa motora. (AU)