Correlação entre prognóstico de melanoma maligno humano e expressão da enzima ácido graxo sintase e de proteínas envolvidas no ciclo celular e na angiogênese

Resumo

Ácido graxo sintase (FASN - fatty acid synthase, EC 2.3.1.85) é a enzima metabólica responsável pela síntese endógena do ácido graxo saturado palmitato, a partir dos precursores acetil-CoA e malonil-CoA. Diversos estudos mostram que, em contraste com a maioria das células normais, FASN é altamente expressa em vários tipos de neoplasias malignas humanas, tais como as de próstata, mama e melanoma sendo que, em alguns destes tumores, a alta expressão de FASN está associada a um pior prognóstico. Recentemente verificamos que a inibição de FASN com Orlistat reduz em 50% o número de linfonodos metastáticos em um modelo animal de metástases espontâneas de melanoma, além de reduzir a proliferação e induzir a apoptose das células de melanoma B16-F10 (Carvalho et al. 2008). Posteriormente demonstramos que, in vitro, a inibição específica da atividade de FASN em linhagem celular de melanoma murino, B16-F10 (i) induz a via intrínseca da apoptose, com liberação de citocromo c e ativação de caspase-3 (Zecchin et al., 2010), (ii) reduz significativamente a proliferação celular através do aumento dos níveis de p21WAF1/Cip1 e de p27Kip1 co-imunoprecipitada com cdk2, acompanhados de redução de cdk2 e Skp2, e (iii) altera a composição dos ácidos graxos livres presentes nas mitocôndrias das células B16-F10 (Zecchin et al., 2011). No entanto, não há relatos na literatura sobre uma possível correlação entre o prognóstico e recidivas de pacientes com melanoma maligno cutâneo com a expressão de FASN, proteínas envolvidas na transição G0/G1-S do ciclo celular e proteínas envolvidas com a angiogênese tumoral. Desse modo, os principais objetivos deste trabalho são (1) avaliar o perfil de expressão de FASN em melanoma maligno cutâneo por imunomarcação em blocos de parafina, (2) analisar, nestas amostras, a expressão das seguintes proteínas envolvidas na transição G0/G1-S: p21WAF1/Cip1, p27Kip1, p16Ink4a, Cdk-4 e Rb por imunohistoquímica, (3) determinar a imunomarcação do fator antiangiogênico VEGF165b e de HIF-1± nestes melanomas e, (4) correlacionar os resultados dos objetivos 1 a 3 com os dados clínicos e histopatológicos destes melanomas, com o tempo de sobrevida global e/ou sobrevida livre de doença, presença de metástases e recidivas das lesões, determinando a utilidade destas proteínas como marcadores prognósticos e de sobrevida.