Estudo in vivo e in vitro da atividade de compostos isolados de própolis brasileiras sobre a modulação da migração de neutrófilos no processo inflamatório

Resumo

A intensa migração de neutrófilos e o dano tecidual que a acompanha, estão presentes em diversas doenças inflamatórias. Portanto, a busca de fármacos que interfiram com o tráfego de neutrófilos no processo inflamatório tem sido cada vez maior. Estudos iniciais do nosso grupo de pesquisa com os compostos neovestitol e vestitol isolados da própolis tipo 13 (vermelha), e com uma fração bioativa identificada da geoprópolis de Melipona scutellaris, mostraram-se promissores sobre a inibição na migração de neutrófilos. No entanto, estes resultados são apenas iniciais, sendo necessários mais estudos para isolar e identificar o composto responsável pela atividade da fração bioativa, bem como comprovar a eficiência dos compostos isolados sobre a inibição da migração de neutrófilos, e por fim elucidar seus mecanismos de ação. Assim, o objetivo deste estudo é avaliar a atividade e possíveis mecanismos dos compostos isolados de própolis brasileiras sobre a modulação da migração de neutrófilos no processo inflamatório. O estudo será conduzido em duas etapas: a primeira será composta pela obtenção dos compostos bioativos (neovestitol e vestitol) da própolis vermelha, como também o isolamento e a identificação do composto bioativo da fração da geoprópolis; na segunda etapa, serão aplicados os ensaios biológicos com os compostos isolados de ambas as própolis, onde serão avaliadas suas atividades sobre: a migração de neutrófilos induzida por LPS ou mBSA; o rolamento leucocitário e a adesão no endotélio vênular; a síntese e/ou liberação de mediadores inflamatórios (TNF-±, CXCL1/KC, CXCL2 e LTB4) no lavado peritoneal in vivo; a expressão das moléculas P-selectina e ICAM-1 (presentes nas células endoteliais); a síntese e/ou liberação de mediadores inflamatórios produzidos por neutrófilos in vitro; as vias de sinalização intracelulares e expressão de Toll-like receptor (TLR) 2, TLR4 e B2-integrinas em neutrófilos in vitro; a quimiotaxia de neutrófilos in vitro e os níveis intracelulares de cálcio; os mecanismos moleculares de ação e efeitos toxicológicos na expressão genômica de células humanas. Espera-se com esse estudo obter compostos bioativos isolados de duas variedades de própolis brasileiras, capazes de inibir a migração de neutrófilos induzida por diferentes estímulos inflamatórios e que tenham os seus mecanismos de ação elucidados. Além disso, espera-se que estas informações contribuam para que futuramente estes compostos possam ser utilizados como novos agentes anti-inflamatórios ou protótipos de novos fármacos. (AU)