Uso de inibidores das histonas deacetilases na transferência nuclear de células somáticas em bovinos.

Resumo

Desde que a TNCS foi demonstrada ser possível em mamíferos, progressos tem sido conseguido, mas o amplo uso desta técnica ainda é impedido devido sua baixa eficiência. Dentre os fatores que contribuem para isto, a desregulação dos genes imprinted e a compactação da cromatina restringindo a reprogramação nuclear estão entre as principais causas. Os inibidores das HDAC surgiram como uma ferramenta poderosa para entender e melhorar o processo de reprogramação nuclear, mas todos os seus efeitos sobre as células tratadas não são completamente entendidos. Por isto, este trabalho propõe investigar o efeito de dois inibidores das HDAC, o Ácido Valpróico e o Ácido B-Hidroxibutírico sobre o metabolismo e epigenoma celular. O objetivo deste projeto é, com estes tratamentos propostos, aumentar a acetilação global do genoma das células doadoras de núcleo, levando a uma maior acessibilidade aos fatores de reprogramação presentes nos oócitos, aumentando assim a eficiência da clonagem em bovinos. Além disso, este projeto também propõe a criação de um modelo in vitro para se estudar como fatores ambientais/nutricionais ou agentes modificadores de cromatina (usados também como fármacos), modificam o epigenoma celular, e se estas modificações são alteradas após a reprogramação, ou são transmitidas para as células-filhas. A investigação dos efeitos da inibição das HDACs sobre o metabolismo e epigenoma das células doadoras de núcleo, e as consequências sobre a reprogramação nuclear ajudará tanto na ciência básica, quanto na ciência aplicada a reprodução animal. Além disso, a compreensão destes mecanismos ajudará futuramente no surgimento de novas abordagens terapêuticas, como o uso de moléculas naturais ou sintéticas, visando alterar a atividade das enzimas modificadoras de cromatina para tratar as doenças.