Importância da proliferação e recirculação de Linfócitos T CD8 efetores de memória para o sucesso da vacinação genética usando a estratégia de prime-boost heterólogo

Resumo

Linfócitos T CD8+ restritos por moléculas de histocompatibilidade do complexo Ia são importantes para a sobrevivência do hospedeiro após infecções virais, bacterianas, fúngicas ou parasitárias. Baseada neste conhecimento, acredita-se que a indução destas células será importante para geração de novas vacinas. Nos últimos 20 anos, evidências sólidas demonstraram que o regime de "prime-boost" heterólogo alcança os melhores resultados em termos de indução de células de CD8+ T efetoras de memória de longa duração protetoras contra diversas infecções experimentais. Embora este regime esteja sendo usado com cada vez mais frequência, como é o caso de muitas vacinas, os mecanismos que suportam sua eficácia ainda são largamente desconhecidos. Certamente parte da sua eficácia depende da geração e manutenção de um grande número de linfócitos específicos poli-funcionais. Entretanto, outras características específicas também podem ser importantes. Será nosso objetivo neste projeto estudar 2 aspectos importantes que podem estar relacionados ao sucesso desta estratégia de vacinação. Assim, testaremos se após o desafio infeccioso, a proliferação e/ou a recirculação dos linfócitos T em geral, e mais especificamente CD8+ específicos, são críticos para a imunidade protetora observada.Para este fim, camundongos serão submetidos à imunização com DNA plasmidial recombinante ("priming") seguida de um reforço ("boost") com adenovírus humano do tipo 5 deficiente em replicação ambos expressando o gene da proteína 2 da superfície de amastigotas de Trypanosoma cruzi. Após o desafio com o T. cruzi, determinaremos o fenótipo e a função dos linfócitos T CD8+ específicos que proliferam e recirculam. A fim de determinar a relevância destes eventos para a imunidade protetora, inibiremos a proliferação destes linfócitos pelo tratamento com a droga hidroxiuréia ou a recirculação destes com a droga FTY-720. Esperamos com estes experimentos determinar o fenótipo e a função dos linfócitos T CD8+ do tipo efetores de memória responsáveis pela imunidade protetora e a importância da proliferação e recirculação destes no sucesso da vacinação empregando a estratégia de "prime-boost' heterólogo. Estes conhecimentos são importantes para o desenvolvimento de vacinas mais eficazes e a compreensão dos mecanismos imunológicos de proteção de mediada por linfócitos T de memória. (AU)