Efeito do zoledronato sobre o processo de reparo alveolar: estudo envolvendo os principais fatores de risco para o desenvolvimento de osteonecrose dos maxilares e avaliação da terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) como proposta preventiva

Resumo

Os bisfosfonatos (BPs) consistem em uma linha de fármacos utilizados no tratamento de algumas osteopatias ou neoplasias malignas osteotrópicas. Os BPs exercem potente ação inibitória sobre o processo de reabsorção óssea. Dentre seus efeitos adversos está a ocorrência da osteonecrose dos maxilares associada à terapia com bisfosfonatos (ONM-BPs). A etiopatogenia da doença é pobremente compreendida, o que dificulta sua prevenção e tratamento. Dentre os fatores de risco para o desencadeamento da ONM-BPs estão: uso crônico de BPs nitrogenados, especialmente o zoledronato, via de administração intravenosa, gênero feminino, idade avançada e intervenções cirúrgicas odontológicas, em especial exodontias. Dentre as poucas propostas terapêuticas preventivas está a antibioticoterapia, a qual se mostra falha e com efeitos adversos. A terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) apresenta capacidade antimicrobiana e potente ação bioestimulatória, o que a coloca como uma potencial estratégia terapêutica preventiva para a ONM-BPs. O objetivo do presente projeto de pesquisa é avaliar o efeito da aPDT no sítio de extração dental e na mucosa sobrejacente de ratas que apresentam os principais fatores de risco para o desenvolvimento de ONM. Cento e vinte ratas (20 meses de idade) serão divididas em oito grupos experimentais: SAL, ZOL, SAL/FS, ZOL/FS, SAL/LLL, ZOL/LLL, SAL/aPDT e ZOL/aPDT. O plano de tratamento medicamentoso terá duração de 7 semanas. As ratas receberão injeções intraperitoneais de 0,45 ml de solução de cloreto de sódio 0,9% (Grupos SAL, SAL/FS, SAL/LLL e SAL/aPDT) ou 0,45 ml da mesma solução acrescida de 100 µg/Kg de zoledronato (Grupos ZOL, ZOL/FS, ZOL/LLL e ZOL/aPDT) com um intervalo de dois dias entre as aplicações. Decorridas três semanas de tratamento todas as ratas serão submetidas à exodontia do primeiro molar inferior direito. Nos grupos SAL/FS e ZOL/FS a ferida cirúrgica será recoberta com 1 ml de azul de metileno (fotossensibilizador) que será mantido neste local por 60s. Nos grupos SAL/LLL e ZOL/LLL as ratas serão submetidas a sessões de irradiação com laser em baixa intensidade (LLL) aos 0, 2 e 4 dias pós exodontia. Nos grupos SAL/aPDT e ZOL/aPDT as ratas serão submetidas a sessões de aPDT aos 0, 2 e 4 dias pós exodontia. Decorridos 28 dias pós-operatórios todas as ratas serão submetidas à eutanásia. Será executado o processamento histológico das hemi-mandíbulas e os cortes histológicos serão submetidos à coloração pela hematoxilina-eosina, vermelho picro-sirius, Gram ou à reação imunoistoquímica. No sítio de extração e na mucosa sobrejacente serão efetuadas: análise histopatológica, análise histomicrobiológica para evidenciação de bactérias, análise histoquímica do nível de maturação do colágeno, análise histométrica do tecido ósseo neoformado e análise imunoistoquímica direcionada para se avaliar os seguintes biomarcadores: antígeno nuclear de proliferação celular (PCNA), proteína X associada ao BCL-2 (BAX), caspase-3-ativada, molécula de adesão celular endotelial à plaqueta 1 (PECAM-1), fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF), fator de transcrição relacionado a runt 2 (RUNX-2), osteocalcina (OCN), fosfatase ácida resistente ao tartarato (TRAP), ligante do receptor ativador do fator nuclear kappa B (RANKL), osteoprotegerina (OPG), proteína morfogenética óssea 2/4 (BMP 2/4) e esclerostina. Os resultados serão analisados em microscopia óptica, submetidos à análise quantitativa e análise estatística com nível de significância de 5%. (AU)