Estimativa da diversidade intra e inter populacional gênica e genética do baculovírus Anticarsia gemmatalis múltiplo nucleopoliedrovírus (AgMNPV) em isolados de campo na América do Sul

Resumo

A família Baculoviridae compreende um grande e diverso grupo de vírus de DNA de fita dupla com genomas abrangendo de 95 a 130 mil pares de base. Estes vírus infectam diversas ordens de insetos, como por exemplo: Lepidoptera, Diptera, Himenoptera, Sifonaptera, Coleoptera etc. Eles apresentam elevada especificidade de hospedeiro, o que favorece seu emprego como controle biológico. Desde 1978, utiliza-se o baculovírus AgMNPV para se combater a lagarta Anticarsia gemmatalis em plantações de soja no Brasil, já tendo sido aplicado em mais de dois milhões de hectares. No nosso grupo, o genoma do protótipo viral (AgMNPV-2D) foi sequenciado em 2006, assim como seu transcriptoma quantificado em 2013 e proteoma elucidado em 2014. Diversos variantes derivados de populações naturais (isolados geográficos) do AgMNPV já foram analisados previamente por meio de RFLP, evidenciando diversos polimorfismos não caracterizados em detalhes. No intuito de se entender a diversidade genômica, iniciamos o estudo de 17 isolados geográficos selvagens de AgMNPV obtidos entre 1980 e 1990 no Brasil, Argentina e Uruguai. As amostras coletadas são populações naturais geneticamente heterogêneas de cultivos de soja sem histórico de uso de baculovírus como bioinseticida. Até o momento, conseguimos obter de maneira preliminar, por meio de sequenciamento maciçamente paralelizado (Roche 454), as sequências mestre de cada isolado geográfico que são os genótipos mais representativos de cada população, independente de uma análise detalhada de linkage e da composição e frequência de polimorfismos. Este projeto de pós-doutoramento visa o estudo detalhado, usando dados a serem gerados por ultra-deep-sequencing na plataforma Illumina, de diversidade genética dos 17 isolados por meio de uma técnica que possibilitará o estudo de linkage e portanto identificar variantes intra-populacionais. Pretendemos também investigar a heterogeneidade e particionamento de variação ao longo das regiões codificantes, não codificantes e regulatórias dos diferentes genomas. (AU)