Efeito do óxido nítrico na modulação das sinapses química e elétrica durante o desenvolvimento da retina

Resumo

No sistema nervoso (SN), o óxido nítrico (NO) está associado a diversos processos fisiológicos e patológicos. A produção endógena do NO depende das sintases de óxido nítrico (NOS), nNOS, eNOS e iNOS; cujos nomes estão relacionados à produção majoritária em neurônios, endotélio e processos inflamatórios, respectivamente. Embora semelhantes estruturalmente, estas enzimas possuem propriedades distintas de expressão e regulação. Este projeto teve como objetivo avaliar o papel do NO sobre a sinaptogênese. Para isso será utilizado a retina de rato como modelo de estudo na qual será administrado o bloqueador de amplo espectro das NOS (L-NAME) e o bloqueador específico da isoforma nNOS (7-NI). Após a injeção intraocular com os fármacos, serão avaliados os níveis de expressão gênica da sinapsina, sinaptofisina e conexinas (por PCR em tempo real), distribuição e quantificação proteica das mesmas (por imunofluorescência e western blotting, respectivamente). Para melhor compreensão do efeito do NO e o mecanismo de ação com o qual ele atua em seus alvos, realizaremos o ensaio de identificação de proteínas S-nitrosiladas. Além disso, os efeitos causados pelos bloqueadores sobre a conectividade e atividade da rede serão mensurados através de registros multieletrodos (mult eletrode array, MEA). (AU)