Efeito do silenciamento do gene Esr1 na regulação da expressão do VEGFA e do Slc2a4/GLUT4 em adipócitos.

Resumo

O estrógeno (E2) regula a angiogenêse em diferentes tecidos e participa da fisiopatologia da obesidade e do diabetes. Em adipócitos, o E2 aumenta a expressão do transportador de glicose GLUT4 (codificado pelo gene Slc2a4) bem como a captação de glicose, o que leva ao aumento da sensibilidade à insulina. Já se sabe que o E2 é capaz de modular a expressão do fator de crescimento do endotélio vascular (VEGFA), o qual é o principal fator angiogênico no tecido adiposo. A interação entre o estrógeno e a regulação do VEGFA pode interferir na fisiologia do tecido adiposo e consequentemente na obesidade e na resistência à insulina. Nossa hipótese é que em adipócitos a expressão do VEGFA e do GLUT4 induzida pelo E2 é mediada principalmente via o receptor de estrógeno1 (ESR1). Nós já observamos que tanto o E2 quanto a ativação do ESR1 aumentaram a expressão do VEGFA e do GLUT4/Slc2a4 em adipócitos 3T3-L1. Desta forma, para contribuir com estes resultados, o objetivo deste projeto é investigar a função do ESR1 na regulação da expressão do VEGFA, GLUT4/Slc2a4 e dos fatores de transcrição CEBPA (CCAAT/enhancer binding protein, alpha) e HIF1A (hypoxia inducible factor 1, alpha subunit). Para tanto, será realizado transfecção in vitro para silenciar o gene Esr1 em adipócitos 3T3-L1. Em seguida, os adipócitos serão tratados ou não com 17beta-estradiol, e análises dos genes e das proteínas, VEGFA, GLUT4/Slc2a4, CEBPA e HIF1A serão realizadas utilizando as técnicas de PCR em tempo real e western blotting, respectivamente. Com estes resultados espera-se entender melhor o envolvimento do Esr1 na regulação do VEGFA e do GLUT4 mediada pelo E2.