Análise da expressão de genes de Streptococcus mutans em biofilme misto

Resumo

Biofilmes orais são formados por diversas espécies microbianas albergadas em uma matriz extracelular. O desenvolvimento de uma matriz extracelular altamente organizada em biofilmes está associado com o processo patogênico da cárie dentária. Streptococcus mutans é o principal microrganismo formador dessa matriz, e ainda tem papel comprovado como patógeno dessa doença. A matriz extracelular de biofilmes virulentos contém exopolissacarídeos produzidos por exoenzimas de S. mutans (glucosiltransferases ou Gtfs, e frutosiltransferase ou ftf) que utilizam sacarose e amido da dieta. DNA extracelular (eDNA) e ácidos lipoteicóicos (ALT) também são detectados nessa matriz, mas as suas funções ainda não estão estabelecidas. Portanto, o objetivo é avaliar a expressão dos genes de S. mutans associados com eDNA (i.e. lytTS) e ALT (i.e. dltABCD, SMU.775) para elucidar quando esses produtos bacterianos são liberados, afetando as propriedades da matriz de biofilmes cariogênicos. Biofilmes mistos contendo S. mutans, Streptococcus gordonii e Actinomyces naeslundii (que são representantes das espécies colonizadoras primárias da cavidade oral) serão formados na presença de sacarose e amido. O RNA total será isolado para avaliar a expressão dos genes usando reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction (RT-qPCR) com primers específicos para cada gene. O conhecimento de como os fatores que contribuem com a virulência de S. mutans são expressos durante o desenvolvimento de biofilmes patogênicos serve de base para implementação de terapias.