Estudo do egresso de tripomastigotas de Trypanosoma cruzi em células infectadas

Resumo

A doença de Chagas é causada pelo protozoário flagelado Trypanosoma cruzi e afeta cerca de 7 milhões de pessoas no mundo. Tripomastigotas de T. cruzi infectam as células do hospedeiro e se diferenciam em formas amastigotas intracelulares; estes, após replicação, se diferenciam em tripomastigotas sanguíneos, que rompem a célula hospedeira e são liberados no meio extracelular. Embora há anos seja estudada a invasão por T. cruzi, pouco se sabe sobre o egresso. Alguns trabalhos demonstram que, semelhante a outros patógenos intracelulares, ocorrem desarranjos nos três filamentos que formam o citoesqueleto, conforme o desenvolvimento intracelular dos parasitas. Outros sugerem que devido ao aumento da permeabilidade celular nos estágios finais da infecção pode haver um influxo de cálcio que promove a liberação de proteases pelo parasita. Foi descrito também que, quando infectadas, células espraiadas sobre substrato liberam tripomastigotas por meio de rupturas nas suas bordas; entretanto, o arredondamento dessas células antes da liberação dos parasitas também foi observado. Essas diferentes morfologias durante o egresso podem estar relacionadas com mecanismos distintos de morte celular; foi reportado que o egresso por apoptose da célula hospedeira pode ser favorável à manutenção da infecção, embora o papel da morte celular seja controverso na literatura. Em nosso laboratório já observamos por microscopia eletrônica de varredura, no momento do egresso, células claramente lisadas, em que os parasitas estavam envoltos por rede de filamentos; encontramos também células com a membrana aparentemente íntegra e aberturas contendo tripomastigotas, possivelmente em estágios "pré-eclosão". Com base na literatura atual e nos nossos resultados preliminares, o presente projeto tem como objetivo investigar se os parasitas modulam a sua eclosão por meio de modificações do citoesqueleto e da membrana das células hospedeiras, se o aumento de permeabilidade das células infectadas ocorre pela atividade de proteínas formadoras de poro, e também se vias metabólicas e de sinalização, além de atividades enzimáticas da célula, são moduladas pelo parasita durante o curso da infecção e na fase de egresso. (AU)