Análise das funções da proteína pepO na virulência sistêmica de Streptococcus mutans

Resumo

Streptococcus mutans (SM), o principal patógeno da cárie dental, pode promover endocardite infecciosa e outras infecções sistêmicas, após atingir a corrente sanguínea. Previamente, mostramos que mutantes defectivos de CovR, um repressor transcricional de genes de virulência oral, são resistentes à fagocitose por PMN na presença de sangue. No projeto de doutorado associado com este pedido de BEPE, demonstramos que cepas SM isoladas de infecções sistêmicas têm menor susceptibilidade à imunidade mediada pelo sistema complemento, quando comparadas a isolados bucais. A deleção do gene que codifica CovR (covR) na cepa oral UA159 comprometeu a fagocitose por PMN mediada por C3b e aumentou a sobrevivência bacteriana em sangue. Identificamos ainda que CovR reprime um gene que codifica uma possível endopeptidase, PepO, e demonstramos que a deleção de pepO em UA159 aumentou a susceptibilidade à deposição de C3b. Em S. pneumoniae, PepO desempenha múltiplas funções de escape ao sistema complemento, incluindo a inativação de C1q, a ligação à proteína inibidora do complemento C4BP e clivagem de C3b através da ligação/ativação de PepO ao plasminogênio. PepO também foi envolvida na degradação de proteínas da matriz extracelular (MEC) do hospedeiro e na invasão de células endoteliais. Algumas destas funções de virulência são atualmente atribuídas à proteína ligadora de colágeno Cnm, a qual é expressa por um número limitado de sorotipos de SM. O objetivo deste projeto BEPE é avaliar as contribuições de PepO e Cnm para virulência sistêmica de SM. Para isto, iremos comparar as atividades transcricionais de pepO em diferentes sorotipos de SM (c, e e f) isolados de infecções sistêmicas que produzem (cnm+) ou não (cnm-) Cnm. A produção de PepO será analisada utilizando-se anticorpos contra a proteína recombinante PepO. A capacidade de ligar-se ao plasminogênio ou a glicoproteínas da MEC, será comparada entre mutantes isogênicos de pepO obtidos a partir de diferentes sorotipos de SM, incluindo cepas cnm + e cnm-. Estes mutantes serão ainda comparados quanto à sua capacidade de invadir células endoteliais in vitro e quanto ao potencial de virulência em modelo in vivo de Galleria mellonella. Portanto, este projeto BEPE poderá fornecer informações importantes sobre as funções de PepO e Cnm para a virulência sistêmica de SM, as quais serão úteis para a seleção do melhor conjunto de alvos terapêuticos, para controle de infecções sistêmicas por diferentes sorotipos de SM. (AU)