Caracterização molecular do GprJ de Aspergillus fumigatus, um receptor acoplado à proteína G envolvido no controle da produção de melanina

Resumo

Aspergillus fumigatus é o mais ubíquo dos fungos que produzem esporos aéreos e a inalação desses esporos pode levar à Aspergilose Pulmonar Crônica em indivíduos imunocomprometidos. Essa doença é de alta gravidade e os índices de mortalidade podem chegar a 100%. Essencial à sobrevivência de A. fumigatus é a sua capacidade de perceber e interagir com o ambiente. Os receptores acoplados à proteína G (GPCRs) são proteínas transmembranares envolvidos na resposta a estímulos externos como hormônios, nutrientes, proteínas, íons e luz. Ao serem ativados, os GPCRs mudam sua conformação e disparam a dissociação entre G± e o heterodímero G²³, sendo que cada um deles é responsável por ativar ou inibir vias de sinalização intracelulares. Como os GPCRs são essenciais à sinalização e seu acesso é fácil na superfície celular, muitos fármacos utilizam GPCRs como alvo. Estima-se que 34% de todos os fármacos tenham como alvo um GPCR. Porém, o conhecimento sobre GPCRs em fungos é limitado, ainda mais para fungos filamentosos. Somente três dos 15 GPCRs preditos em A. fumigatus estão caracterizados. O estudo de GPCRs é complicado pelo fato de que a maioria dos mutantes não apresenta nenhum fenótipo evidente. Uma avaliação preliminar de uma biblioteca de deleção para todos os 15 mutantes mostrou que a linhagem “gprJ produz um pigmento escuro em meio líquido, indicando que o GprJ regula a produção de melanina. O presente projeto se propõe a caracterizar o GprJ em relação a tolerância a diferentes estresses, virulência, sinalização via MAP Kinase, controle da expressão gênica e parceiros proteicos. Nossos resultados ajudarão a entender como A. fumigatus percebe o ambiente e contribuirão para um melhor entendimento dos GPCRs em fungos. (AU)