Caracterização da interação de HJURP-proteínas em linhagens de glioma submetidas a diferentes tipos de danos ao DNA

Resumo

A proteína de reconhecimento da junção de Holliday (HJURP) é superexpressa em muitos tumores e também está correlacionada com mau prognóstico. A HJURP possui uma atividade bem descrita como chaperona deposição de CENP-A em centrômeros. Nosso grupo estuda a participação da HJURP no reparo do DNA de dupla fita (DSB) nas células de glioma. Observamos que a HJURP é recrutada para locais de dano no DNA, promovendo o relaxamento da cromatina e favorecendo a restauração da quebra de dupla fita induzidas por radiação principalmente pela via de recombinação homóloga. Além disso, a HJURP promove um aumento na proliferação de linhagens celulares de glioblastoma e favorece o reparo de lesões de DNA resultantes do estresse replicativo. Também encontramos uma forte correlação da expressão de HJURP com os índices proliferativos de amostras de tumores de banco de dados público e identificamos vários genes envolvidos no controle do ciclo celular, anemia de Fanconi e vias de recombinação homóloga, co-expressas com HJURP em astrocitomas. Esses dados sugerem a participação da HJURP no controle do estresse replicativo, estabilidade cromossômica e desenvolvimento do câncer. Portanto, neste projeto pretendemos realizar experimentos de imunoprecipitação, espectrometria de massa e análise bioinformática para investigar quais proteínas interagem com HJURP em diferentes contextos celulares: i) células normais e cancerígenas com expressão basal de HJURP e com indução exógena de HJURP, ii) células com dano no DNA induzido por radiação, iii) e células com dano induzido por drogas que mimetizam o estresse replicativo. A geração desses dados nos permitirá um progresso considerável no entendimento das novas funções do HJURP, ainda não descritas. (AU)