Análise proteômica e fosfoproteômica dos eventos moleculares e sinalização celular no modelo de células CAR-T Anti-CD-19 usado no tratamento de Leucemia e Linfoma

Resumo

Neoplasias hematológicas respondem por 25 mil novos casos todos os anos no Brasil. Dentre as opções para tratamento, a terapia com células T expressando o receptor de antígeno quimérico (CAR) vem se demonstrando eficaz para a Leucemia de células B e linfoma. Nesta imunoterapia celular autóloga, células T derivadas do sangue do paciente são engenheiradas in vitro para expressar receptores artificiais, como o anti-CD-19, e atacar especificamente células malignas derivadas de células B. Os desafios terapêuticos da terapia com CAR-T estão relacionados à eficácia e persistência das células modificadas, a eventual ocorrência de recidiva e os efeitos adversos, que incluem a síndrome de liberação de citocinas grave (SRC). Ainda, mecanismos de sinalização molecular envolvidos no tratamento e na resposta do paciente são desconhecidos. Propomos investigar os mecanismos moleculares da terapia com células CAR-T usando estratégias proteômicas para analisar as alterações celulares induzidas na transfecção e expressão de anti-CD19. Os perfis de proteoma celular, secretoma e fosfoproteoma serão analisados em modelos de indução de anti-CD19 CAR-T de células de doadores saudáveis. Experimentos de co-cultura de células CAR-T com células que expressam CD19 marcadas isotopicamente podem revelar eventos de sinalização e perfis de citocinas induzidos com o contato e comunicação celular em um ambiente de reconhecimento simulado. As assinaturas moleculares reveladas serão validadas pela proteômica dirigida, citometria de fluxo e imunoensaios convencionais. Nosso estudo fornecerá respostas sobre os mecanismos da produção e resposta das CAR-T, contribuindo para o avanço desta estratégia terapêutica, além de potencialmente melhorar o manejo clínico da Leucemia e Linfoma. (AU)