Efeitos da exposição a produtos de tabaco sobre linfócitos t cd4+ envolvidos na gênese da esclerose multipla

Resumo

O tabagismo está relacionado a patogenia da esclerose múltipla (EM), uma doença autoimune neurodegenerativa desmielinizante, mediada por linfócitos T; No entanto, a participação dos componentes da combustão tabaco e da nicotina na sua gênese é controversa. Cigarros não combustíveis (heat-not-burn tobacco; HNBT) têm surgido como alternativas menos tóxicas ao cigarro convencional (CC) por liberar nicotina, propileno glicol e glicerina, e níveis inferiores de produtos da queima do tabaco em comparação ao CC. O presente projeto visa analisar os efeitos da exposição in vitro e in vivo ao HNBT, CC ou à solução de nicotina sobre a biologia de linfócitos T CD4+ e sobre a evolução clínica da encefalomielite autoimune experimental (EAE). Para tanto, linfócitos T CD4+ de pacientes saudáveis ou com EM serão coletados e expostos in vitro à nicotina, HNBT ou CC para avaliar os efeitos sobre polarização em Th1, Th17 e Treg, proliferação, influxo de cálcio, ativação do fator nuclear kappa B (NFºB), proteína ativadora 1 (AP-1), fator nuclear das células T ativadas 1 (NFAT1) e receptor de hidrocarbonetos arila (AhR) por citometria de fluxo; secreção de citocinas por ELISA; e os níveis dos mi-RNAs 21, 145, 155, 233 e 326 por RT-qPCR. Camundongos C57Bl/6 serão submetidos a EAE e serão expostos à solução de nicotina aerolizada, HNBT ou CC durante o pico da doença (14º ao 20º após indução da EAE) para avaliar a evolução clínica, histopatologia do SNC, expressão de zonula occludentes e claudina 1 e 5 por western blotting, frequência de linfócitos por citometria de fluxo, das expressões de NFºB, AP-1, NFAT1 e AhR. Ainda é objetivo solicitar estágio BEPE para avaliar os efeitos das exposições a nicotina e dos receptores nicotínicos nos diferentes end points observados nos ensaios in vitro e in vivo no modelo experimental de C. elegans no Laboratório de Neurotoxicidade do prof. Dr. Michael Aschner do Albert Eisntein College of Medicine, Nova Iorque - EUA. Associados, os resultados obtidos contribuirão para a elucidação da nicotina e dos produtos da combustão do CC sobre o desenvolvimento da EAE e para elucidar a toxicidade dos HNBT sobre o sistema nervoso central e sistema imune.