Mecanismos tóxicos dos produtos fumígenos sobre a produção e mobilização de neutrófilos em condições normais e na vigência de artrite reumatoide

Resumo

O tabagismo é uma doença crônica desencadeada pela dependência a nicotina, além dos inúmeros compostos tóxicos liberados da combustão do tabaco. Sendo assim, formas de exposição à nicotina têm sido desenvolvidos, entre os quais o Heat Not Burn Tobacco (HNBT), que consiste na exposição pelo aquecimento do tabaco, sem gerar combustão. Embora se proponha que os HNBT possam ser menos tóxicos que o cigarro convencional (CC), não existem dados suficientes para a avaliação do risco dos mesmos. Dados do nosso grupo mostram que a exposição de camundongos ao HNBT prejudica a mobilização de neutrófilos para o compartimento inflamado na vigência de artrite reumatoide (AR). Assim, neste projeto será investigado o efeito das exposições ao CC, HNBT ou nicotina aerolissada sobre os mecanismos da produção e mobilização dos neutrófilos da medula óssea para o sangue, e deste para os tecidos em condições normais ou na vigência da AR induzida por antígenos (AIA). As exposições ao CC, HNBT, ou ao ar (controle) in vivo ocorrerão seguindo o regime de exposição do Canadá, em exposições diárias (2 vezes ao dia, 1 hora cada), por 5 dias, segundo protocolos já estabelecidos no laboratório. As exposições em animais AR serão realizadas dos dias 16 a 20 após a sensibilização ao antígeno, no 21° dia, os animais serão desafiados com o antígeno, e as amostras serão coletadas 24 horas mais tarde. As exposições à nicotina serão realizadas da mesma forma que o esquema descritos acima. As seguintes amostras serão coletadas: sangue periférico e perfusato da medula óssea para contagem total e diferencial de leucócitos e imunofenotipagem; plasma e lavado sinovial para dosar mediadores inflamatórios; órgãos linfoides para a imunofenotipagem; sangue total para dosagem dos níveis séricos de nicotina, cotinina, hidrocarbonetos aromáticos policíclicos, compostos carbonilados e carboxihemoglobina. Ensaios in vitro serão realizados, utilizando a linhagem C1498 (linfoblastos murinos) para avaliar mecanismos da citotoxicidade que possam estar envolvidos no prejuízo da granulopoese. O projeto aqui proposto é inédito e os resultados obtidos elucidarão mecanismos de toxicidade causados por diferentes produtos envolvidos no tabagismo.