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(Referência obtida automaticamente do Web of Science, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores.)

Structural insights on the efficient catalysis of hydroperoxide reduction by Ohr: Crystallographic and molecular dynamics approaches

Texto completo
Autor(es):
Piccirillo, Erika [1] ; Alegria, Thiago G. P. [2] ; Discola, Karen F. [2] ; Cussiol, Jose A. R. R. [3, 2] ; Domingos, Renato M. [2] ; de Oliveira, Marcos A. [4] ; de Rezende, Leandro [1] ; Netto, Luis E. S. [2] ; Amaral, Antonia T-do [1]
Número total de Autores: 9
Afiliação do(s) autor(es):
[1] Univ Sao Paulo, Inst Quim, Dept Quim Fundamental, Sao Paulo, SP - Brazil
[2] Univ Sao Paulo, Inst Biociencias, Dept Genet & Biol Evolut, Sao Paulo, SP - Brazil
[3] Univ Fed Sao Paulo, Dept Bioquim, Sao Paulo, SP - Brazil
[4] Univ Estadual Paulista, Inst Biociencias, Campus Litoral Paulista, Sao Vicente, SP - Brazil
Número total de Afiliações: 4
Tipo de documento: Artigo Científico
Fonte: PLoS One; v. 13, n. 5 MAY 21 2018.
Citações Web of Science: 1
Resumo

Organic hydroperoxide resistance (Ohr) enzymes are highly efficient Cys-based peroxidases that play central roles in bacterial response to fatty acid hydroperoxides and peroxynitrite, two oxidants that are generated during host-pathogen interactions. In the active site of Ohr proteins, the conserved Arg (Arg19 in Ohr from Xylella fastidiosa) and Glu (Glu51 in Ohr from Xylella fastidiosa) residues, among other factors, are involved in the extremely high reactivity of the peroxidatic Cys (C-p) toward hydroperoxides. In the closed state, the thiolate of C-p is in close proximity to the guanidinium group of Arg19. Ohr enzymes can also assume an open state, where the loop containing the catalytic Arg is far away from C-p and Glu51. Here, we aimed to gain insights into the putative structural switches of the Ohr catalytic cycle. First, we describe the crystal structure of Ohr from Xylella fastidiosa (XfOhr) in the open state that, together with the previously described XfOhr structure in the closed state, may represent two snapshots along the coordinate of the enzyme-catalyzed reaction. These two structures were used for the experimental validation of molecular dynamics (MD) simulations. MD simulations employing distinct protonation states and in silico mutagenesis indicated that the polar interactions of Arg19 with Glu51 and C-p contributed to the stabilization of XfOhr in the closed state. Indeed, C-p oxidation to the disulfide state facilitated the switching of the Arg19 loop from the closed to the open state. In addition to the Arg19 loop, other portions of XfOhr displayed high mobility, such as a loop rich in Gly residues. In summary, we obtained a high correlation between crystallographic data, MD simulations and biochemical/enzymatic assays. The dynamics of the Ohr enzymes are unique among the Cys-based peroxidases, in which the active site Arg undergoes structural switches throughout the catalytic cycle, while C-p remains relatively static. (AU)

Processo FAPESP: 14/01614-5 - Aplicação de dinâmica molecular para melhorar modelos farmacofóricos da protease NS2B/NS3 do DENV, considerando a flexibilidade conformacional da protease, e para validar modelos de homologia para diferentes serotipos de proteases
Beneficiário:Erika Piccirillo
Linha de fomento: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado Direto
Processo FAPESP: 13/07937-8 - Redoxoma
Beneficiário:Ohara Augusto
Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Centros de Pesquisa, Inovação e Difusão - CEPIDs
Processo FAPESP: 08/07971-3 - Caracterização cinética e busca de inibidores de Ohr (organic hydroperoxide Resistence Protein)de Xylella fastidiosa
Beneficiário:Thiago Geronimo Pires Alegria
Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Mestrado
Processo FAPESP: 12/06633-2 - Busca racional de inibidores de proteases virais da Dengue e da Febre Aftosa
Beneficiário:Erika Piccirillo
Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
Processo FAPESP: 09/12885-1 - Caracterização funcional e estrutural das glutarredoxinas de Saccharomyces Cerevisiae: identificação de resíduos relacionados à atividade oxidorredutase
Beneficiário:Karen Fulan Discola
Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Processo FAPESP: 05/50056-6 - Caracterização funcional de uma nova proteína antioxidante: Ohr (organic hydroperoxide resistance protein): vias de redução e expressão em Xylella fastidiosa
Beneficiário:José Renato Rosa Cussiol
Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
Processo FAPESP: 16/12392-9 - 21st European symposium on Quantitative Structure-Activity Relationship where molecular simulations meet drug discovery
Beneficiário:Antonia Tavares Do Amaral
Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Reunião - Exterior