Conditional genome engineering reveals canonical and divergent roles for the Hus1 component of the 9-1-1 complex in the maintenance of the plastic genome of Leishmania

Autor(es)

Damasceno, Jeziel D. ^[1] ; Obonaga, Ricardo ^[1] ; Silva, Gabriel L. A. ^[1] ; Reis-Cunha, Joao L. ^[2] ; Duncan, Samuel M. ^[3] ; Bartholomeu, Daniella C. ^[2] ; Mottram, Jeremy C. ^{[4, 3]} ; McCulloch, Richard ^[3] ; Tosi, Luiz R. O. ^[1]

Afiliação do(s) autor(es)

^[1] Univ Sao Paulo, Ribeirao Preto Med Sch, Dept Cell & Mol Biol, BR-14049900 Ribeirao Preto, SP - Brazil

^[2] Univ Fed Minas Gerais, Inst Ciencias Biol, Dept Parasitol, Lab Genom Parasitos, BR-31270901 Belo Horizonte, MG - Brazil

^[3] Univ Glasgow, Wellcome Ctr Mol Parasitol, Inst Infect Immun & Inflammat, Glasgow G12 8TA, Lanark - Scotland

^[4] Univ York, Dept Biol, Ctr Immunol & Infect, York YO10 5DD, N Yorkshire - England

• Tipo de documento: Artigo Científico
• Fonte: Nucleic Acids Research; v. 46, n. 22, p. 11835-11846, DEC 14 2018.
• Citações Web of Science: 2

Resumo

Leishmania species are protozoan parasites whose remarkably plastic genome limits the establishment of effective genetic manipulation and leishmaniasis treatment. The strategies used by Leishmania to maintain its genome while allowing variability are not fully understood. Here, we used DiCre-mediated conditional gene deletion to show that HUS1, a component of the 9-1-1 (RAD9-RAD1-HUS1) complex, is essential and is required for a G2/Mcheckpoint. By analyzing genome-wide instability in HUS1 ablated cells, HUS1 is shown to have a conserved role, by which it preserves genome stability and also a divergent role, by which it promotes genome variability. These roles of HUS1 are related to distinct patterns of formation and resolution of single-stranded DNA and gamma H2A, throughout the cell cycle. Our findings suggest that Leishmania 9-1-1 subunits have evolved to co-opt canonical genomic maintenance and genomic variation functions. Hence, this study reveals a pivotal function of HUS1 in balancing genome stability and transmission in Leishmania. These findings may be relevant to understanding the evolution of genome maintenance and plasticity in other pathogens and eukaryotes. (AU)

• Processo FAPESP: 14/00751-9 - Identificação de proteínas que interagem com LmRad9, LmHus1 e LmRad1 e geração de linhagem de nocaute condicional para LmHus1
• Beneficiário: Jeziel Dener Damasceno
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Pós-Doutorado
• Processo FAPESP: 17/07092-9 - Como as proteínas de checkpoint Rad9 e Hus1 atuam na manutenção da estabilidade do genoma do protozoário Leishmania major?
• Beneficiário: Luiz Ricardo Orsini Tosi
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Processo FAPESP: 14/06824-8 - Caracterização das proteínas LmRad9 e LmRad1 na resposta a danos no DNA de Leishmania major
• Beneficiário: Luiz Ricardo Orsini Tosi
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Processo FAPESP: 13/00570-1 - Caracterização do possível complexo 9-1-1 de Leishmania major
• Beneficiário: Jeziel Dener Damasceno
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Processo FAPESP: 16/16454-9 - Caracterização da quinase ATR de Leishmania major e de seu papel na sinalização do estresse no processo de replicação do DNA
• Beneficiário: Gabriel Lamak Almeida da Silva
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Processo FAPESP: 16/50050-2 - How do common and diverged features of the replicative stress response shape the biology of TriTryp parasites?
• Beneficiário: Maria Carolina Quartim Barbosa Elias Sabbaga
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Temático