| Texto completo | |
| Autor(es): |
de Paula, Carla Peres
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dos Santos, Melina Cardoso
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Tairum, Carlos A.
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Breyer, Carlos Alexandre
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Toledo-Silva, Guilherme
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Toyama, Marcos Hikari
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Mori, Gustavo Maruyama
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de Oliveira, Marcos Antonio
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Número total de Autores: 8
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| Afiliação do(s) autor(es): | [1] UNESP Sao Paulo State Univ, Biosci Inst, Lab Struct Mol Biol, Sao Vicente, SP - Brazil
[2] Univ Fed Santa Catarina, Dept Biochem, Lab Biomarkers Aquat Contaminat & Immunochem, Florianopolis, SC - Brazil
[3] UNESP Sao Paulo State Univ, Biosci Inst, Lab Funct & Struct Characterizat Toxins Venomous, Sao Vicente, SP - Brazil
[4] UNESP Sao Paulo State Univ, Biosci Inst, Mol Ecol Lab, Sao Vicente, SP - Brazil
Número total de Afiliações: 4
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| Tipo de documento: | Artigo Científico |
| Fonte: | Applied Microbiology and Biotechnology; v. 104, n. 12 APR 2020. |
| Citações Web of Science: | 0 |
| Resumo | |
The pathogen Xylella fastidiosa belongs to the Xanthomonadaceae family, a large group of Gram-negative bacteria that cause diseases in many economically important crops. A predicted gene, annotated as glutaredoxin-like protein (glp), was found to be highly conserved among the genomes of different genera within this family and highly expressed in X. fastidiosa. Analysis of the GLP protein sequences revealed three protein domains: one similar to monothiol glutaredoxins (Grx), an Fe-S cluster and a thiosulfate sulfurtransferase/rhodanese domain (Tst/Rho), which is generally involved in sulfur metabolism and cyanide detoxification. To characterize the biochemical properties of GLP, we expressed and purified the X. fastidiosa recombinant GLP enzyme. Grx activity and Fe-S cluster formation were not observed, while an evaluation of Tst/Rho enzymatic activity revealed that GLP can detoxify cyanide and transfer inorganic sulfur to acceptor molecules in vitro. The biological activity of GLP relies on the cysteine residues in the Grx and Tst/Rho domains (Cys(33) and Cys(266), respectively), and structural analysis showed that GLP and GLP(C266S) were able to form high molecular weight oligomers (> 600 kDa), while replacement of Cys(33) with Ser destabilized the quaternary structure. In vivo heterologous enzyme expression experiments in Escherichia coli revealed that GLP can protect bacteria against high concentrations of cyanide and hydrogen peroxide. Finally, phylogenetic analysis showed that homologous glp genes are distributed across Gram-negative bacterial families with conservation of the N- to C-domain order. However, no eukaryotic organism contains this enzyme. Altogether, these results suggest that GLP is an important enzyme with cyanide-decomposing and sulfurtransferase functions in bacteria, whose presence in eukaryotes we could not observe, representing a promising biological target for new pharmaceuticals. (AU) | |
| Processo FAPESP: | 13/16192-6 - Análise do papel da Thr44 de Tsa1 de Saccharomyces cerevisiae na catálise de hidroperóxidos, interação com Trx, oligomerização e processo de superoxidação |
| Beneficiário: | Melina Cardoso dos Santos |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Iniciação Científica |
| Processo FAPESP: | 13/07937-8 - Redoxoma |
| Beneficiário: | Ohara Augusto |
| Modalidade de apoio: | Auxílio à Pesquisa - Centros de Pesquisa, Inovação e Difusão - CEPIDs |
| Processo FAPESP: | 17/19942-7 - Busca de inibidores do sistema peroxirredoxina de patógenos e humanos |
| Beneficiário: | Marcos Antonio de Oliveira |
| Modalidade de apoio: | Auxílio à Pesquisa - Regular |
| Processo FAPESP: | 17/06263-4 - Avaliação de moléculas bioativas como inibidores do sistema antioxidante de peroxirredoxinas 2-Cys típicas (AhpC) em bactérias |
| Beneficiário: | Melina Cardoso dos Santos |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Doutorado |
| Processo FAPESP: | 11/13500-6 - Investigação dos determinantes moleculares envolvidos na interação com os substratos de Tsa1 e Tsa2 de Saccharomyces cerevisiae |
| Beneficiário: | Carlos Alexandre Breyer |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Doutorado |
| Processo FAPESP: | 07/50930-3 - Análise funcional e estrutural de proteínas antioxidantes dependentes de tióis: uma investigação de mecanismos moleculares de catálise e da formação de complexos protéicos contendo dissulfetos mistos |
| Beneficiário: | Marcos Antonio de Oliveira |
| Modalidade de apoio: | Auxílio à Pesquisa - Jovens Pesquisadores |
| Processo FAPESP: | 17/20291-0 - Caracterização da atividade pró-inflamatória de uma nova serino protease (cdtsp-2) purificada do veneno total de Crotalus durissus terrificus |
| Beneficiário: | Marcos Hikari Toyama |
| Modalidade de apoio: | Auxílio à Pesquisa - Regular |
| Processo FAPESP: | 10/00172-8 - Investigação de transições estruturais e da reatividade sobre peróxidos de TSA1 (thiol specific antioxidant protein 1) de Saccharomyces cerevisiae |
| Beneficiário: | Carlos Abrunhosa Tairum Junior |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Doutorado Direto |
| Processo FAPESP: | 10/16827-3 - Caracterização funcional e estrutural da proteína Glurho de Xylella fastidiosa. |
| Beneficiário: | Carla Peres de Paula |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Iniciação Científica |