"Structure Resolution of Citrus sinensis PABPN and WSP proteins involved in mRNA stabilization associated with citrus canker development"

• Grant number: 10/16235-9
• Support Opportunities: Scholarships in Brazil - Post-Doctoral
• Start date: March 01, 2011
• End date: February 28, 2014
• Field of knowledge: Biological Sciences - Biochemistry - Molecular Biology
• Principal Investigator: Celso Eduardo Benedetti
• Grantee: Mariane Noronha Domingues
• Host Institution: Centro Nacional de Pesquisa em Energia e Materiais (CNPEM). Campinas , SP, Brazil

Abstract

O cancro cítrico, causado pelo fitopatógeno Xanthomonas axonopodis pv. citri (Xac), constitui uma doença que afeta a maioria das espécies do gênero Citrus ocorrendo praticamente em todos continentes e se destaca como uma ameaça à citricultura brasileira. Constatamos em nosso grupo que PthA, o principal efetor de patogenicidade tipo III de Xac, atua como um ativador transcricional e interage com várias proteínas da planta hospedeira que possuem motivos de ligação a DNA ou RNA e estão envolvidas no controle transcricional, estabilização de RNA e reparo de DNA. Elucidar como a PthA ativa a transcrição é de grande importância para o esclarecimento do seu modo de ação e da patogenicidade de Xac. Este trabalho visa elucidar a estrutura tridimensional e função de duas proteínas de laranja doce (Citrus sinensis) que interagiram com PthA em ensaios de duplo-híbrido e GST pull-down. A primeira proteína é uma PABPN (Nuclear Poly(A)-Binding Protein), a qual possui um domínio de reconhecimento de RNA (RRM) e está envolvida no processamento, estabilização e tradução de mRNAs. Embora já tenham sido resolvidas estruturas referentes ao domínio RRM, ainda não há nenhuma estrutura completa de uma PABP. A segunda proteína, denominada Water Stress Protein (WSP), é semelhante a fatores de transcrição que reconhecem sequências CCAAT em promotores de diferentes organismos. Elementos CCAAT foram encontrados em promotores de citros up-regulados por PthA. Pouco se conhece sobre estrutura e função da proteína WSP e não há estrutura resolvida até o momento para nenhuma proteína dessa família. Dessa forma, pretendemos elucidar a estrutura e função da proteína WSP, a qual acreditamos funcionaria como um ativador transcricional. É esperado que a resolução da estrutura dessas proteínas traga informações relevantes sobre o mecanismo de interação entre Xac x Citrus, um esclarecimento adicional sobre o modo de ação de PthA e o desenvolvimento dos sintomas do cancro cítrico.