Structural Comparative Analysis of Toxic and Non-Toxic Acidic Phospholipase A2 Isolated from Snake Venoms.

• Grant number: 08/00977-6
• Support Opportunities: Scholarships in Brazil - Post-Doctoral
• Start date: August 01, 2008
• End date: March 31, 2010
• Field of knowledge: Biological Sciences - Biophysics - Molecular Biophysics
• Principal Investigator: Andreimar Martins Soares
• Grantee: Daniela Priscila Marchi Salvador
• Host Institution: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brazil
• Associated research grant: 05/54855-0 - Animal toxins: structure, function and biotechnological applications, AP.TEM

Abstract

O veneno das serpentes é constituído por diversos componentes protéicos como proteases (metalo e serinoproteases), fosfolipases A2 (PLA2), L-aminoácido oxidases, entre outros, capazes de induzir diferentes efeitos fisiopatológicos. Estes venenos de serpentes são ricas fontes de fosfolipases A2 e essas enzimas possuem uma grande variedade de efeitos farmacológicos e/ou tóxicos, como mionecrótico, anticoagulante, inibição de agregação plaquetária, neurotoxicidade, cardiotoxicidade, hipotensão arterial e envolvimento nos processos inflamatório. As PLA2s ácidas de venenos de serpentes ainda não foram claramente caracterizadas do ponto de vista da relação estrutura-função, fazendo com que nos últimos anos aumentasse o interesse sobre seus estudos. O projeto propõe estudos bioquímicos, farmacológicos e estruturais comparativos entre as fosfolipases A2 ácidas tóxicas e não-tóxicas isoladas de venenos de serpentes na tentativa de melhor compreender o(s) possível(eis) mecanismo(s) de ação(ões) destas enzimas. Dentro deste contexto, este projeto propõe a análise funcional e estrutural comparativa das PLA2s ácidas tóxicas e não-tóxicas isoladas dos venenos de Bothrops moojeni (BmooTX-I, PLA2 ácida tóxica e Bmoo-I-PLA2, não-tóxica), B. pirajai (BpirPLA2 ácida não-tóxica) e Lachesis muta (LmTX-I, PLA2 ácida tóxica), avaliando: (i)-As atividades enzimáticas (fosfolipásica sobre diferentes substratos) e farmacológicas (efeito sobre plaquetas); (ii)-Os efeitos sobre a resposta inflamatória (ensaios in vitro avaliando a expressão das enzimas COX-1 e COX-2; (iii)-Os estudos estruturais, na tentativa de elucidar a estrutura tridimensional destas diferentes proteínas por técnicas de cristalografia de raios X e modelagem molecular. Desta forma, este projeto permitirá a possível elucidação do mecanismo de ação das PLA2s ácidas sobre a toxicidade e o processo inflamatório.