Expression and characterization of a thrombin-like serine proteinase from Bothrops pauloensis snake venom and its interference in hemostasis

• Grant number: 10/06429-0
• Support Opportunities: Scholarships in Brazil - Post-Doctoral
• Start date: September 01, 2010
• End date: May 31, 2012
• Field of knowledge: Biological Sciences - Biochemistry - Molecular Biology
• Principal Investigator: Eliane Candiani Arantes Braga
• Grantee: Renata Santos Rodrigues
• Host Institution: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brazil

Abstract

Avanços nos estudos relacionados à ação de toxinas animais em diferentes mecanismos biológicos têm contribuído de forma significativa para o desenvolvimento de novos fármacos bem como na adoção de estratégias terapêuticas mais eficazes em várias doenças humanas. Não obstante a estas considerações, os mecanismos de ação das toxinas ofídicas ainda são pouco conhecidos. As peçonhas das serpentes, especialmente da família Viperidae (jararacas, cascavéis, surucucus) contêm um grande número de proteínas farmacológica e bioquimicamente ativas, sendo que cerca de 90% do peso seco consistem em proteínas. Muitas dessas toxinas são enzimas como as fosfolipases A2, serinoproteases, metaloproteases, L-aminoácido oxidases, que comprometem a hemostasia, interferindo em eventos biológicos importantes como apoptose, inflamação, necrose tecidual, coagulação requerendo assim estudos mais aprofundados. Tendo em vista estas informações, o presente trabalho tem como objetivo expressar uma serinoprotease "thrombin-like" da peçonha de B. pauloensis bem como avaliar sua ação sobre fibrinogênio, fibrina e substratos cromogênicos. A maneira na qual essas toxinas interferem na hemostasia será avaliada através de ensaios de agregação plaquetária, coagulação sanguínea, fibrinólise e ensaios biológicos como incoagulabilidade sanguínea e trombose venosa in vivo. Os dados obtidos neste trabalho poderão contribuir para o desenvolvimento de fármacos que serão úteis como potentes ferramentas em testes laboratoriais, usos clínicos e como modelos teóricos de hemostasia e trombose.