Expressão gênica de fibroblastos associados a carcinomas de mama classificados em subtipos de acordo com receptores de estrógeno e progesterona e C-ERBB2

Resumo

Câncer de mama é uma doença heterogênea que compreende vários tipos fenotipicamente distintos, mas que atualmente se classificam em 3 subtipos principais baseando-se na expressão gênica: luminal (ER+PR+erbB2-), Her 2/neu+, e basal (ER-PR-erbB2-, citoqueratina 5/6). Esta heterogeneidade biológica tem implicações para o tratamento e prognóstico. Evidências crescentes demonstraram que células estromais são modificadoras da iniciação e progressão tumorais e acrescentaram mais um fator a esta complexidade derivado dos efeitos induzidos pelas interações heterotípicas entre epitélio e estroma. Uma pergunta fundamental ainda não analisada é: quais são as mudanças ocorridas nestes fibroblastos que acompanham a perda da sensibilidade hormonal. A proposta do projeto 1 é isolar fibroblastos associados a tumores luminais ou basais e fibroblastos normais pela metodologia da captura por microdissecção a laser e utilizar metodologias de sequenciamento em grande escala, para identificar genes diferencialmente expressos. O subprojeto 2 pretende identificar nos fibroblastos definidos no projeto 1, assinaturas de microRNAs, uma vez que estes exercem um papel critico em diversos processos biológicos funcionando como reguladores.No subprojeto 3 pretendemos verificar o efeito do tratamento com vitamina D sobre a proliferação de fibroblastos normais ou associados ao tumor de mama obtidos por cultura primária e as modificações do perfil gênico induzidas por vitamina D nos fibroblastos normais pareados.No subprojeto 4 pretendemos determinar a influência de fibroblastos obtidos de tumor primário e de linfonodo comprometido na expressão das células de câncer de mama e avaliar genes selecionados em amostras de câncer de mama e respectivos linfonodos. (AU)