Estudo genômico funcional da regulação transcricional por receptores nucleares no raquitismo hereditário resistente a Vitamina D

Resumo

O raquitismo hereditário resistente à vitamina D (HVDRR) é uma doença genética autossômica recessiva com manifestação grave e precoce caracterizada por hipocalcemia na vigência de altos níveis séricos de calcitriol. Mutações no receptor de vitamina D (VDR) constituem o defeito molecular primário desta condição, e explicam suas manifestações hipocalcêmicas. Entretanto, a despeito do defeito permanente no receptor, muitos pacientes com HVDRR evoluem com remissão clínica espontânea mesmo em períodos de grande demanda de cálcio. Em nosso serviço, acompanhamos um paciente com defeito grave do VDR (mutação nonsense p.R30X em homozigose) que evoluiu com melhora espontânea do raquitismo e da hipocalcemia. O mecanismo desta remissão não é conhecido. O receptor de vitamina D é um fator de transcrição do tipo receptor nuclear expresso em virtualmente todos tecidos humanos que, uma vez ativado por calcitriol, regula a transcrição gênica através de ligação direta a elementos de resposta no DNA. Apesar de diversos genes-alvo regulados por VDR serem conhecidos, ainda não há conhecimento completo do conjunto de genes diretamente regulado por VDR em células humanas, dificultando o reconhecimento de mecanismos regulatórios combinatórios envolvendo outros sistemas esteróide-receptor nuclear. Este projeto de pesquisa visa: 1) definir o espectro de regulação por VDR em células humanas através da comparação da resposta genômica ao calcitriol na presença e ausência de receptor funcional, utilizando técnicas robustas como microarrays de expressão gênica e imunoprecipitação de cromatina seguida de sequenciamento paralelo (ChIP-Seq); 2) identificar os mecanismos moleculares compensatórios envolvendo receptores nucleares que expliquem o curso clínico inesperado do HVDRR. Considerando-se o crescente reconhecimento de funções biológicas do calcitriol além do metabolismo mineral e a preocupação atual com o estado de suficiência de vitamina D na população geral, os achados desta investigação terão relevantes implicações. (AU)