Epigenética da reprogramação em células germinativas embrionárias caninas

Resumo

A reprogramação epigenética é fundamental para a regulação do genoma durante o desenvolvimento das células germinativas, responsáveis por originar a linhagem gametogênica nos mamíferos. A desmetilação em células germinativas primordiais é um evento único essencial para apagar a memória epigenética e também prevenir transmissões de epimutações para a próxima geração. Há poucas informações sobre quão conservados são estes eventos em mamíferos, principalmente em canídeos. O cão doméstico (Canis lúpus familiaris) apresenta-se como um modelo ideal para o estudo do desenvolvimento em mamíferos por possuir inúmeras similaridades com a bioquímica e fisiologia humanos. Portanto objetiva-se nesta proposta estudar a dinâmica epigenética nas células germinativas embrionárias desde seu desenvolvimento inicial até a migração e formação da crista genital através de padrões de metilação de DNA e acetilação de histonas. Para tal, em uma primeira etapa será realizada a derivação de possíveis células germinativas embrionárias caninas nos períodos de 20, 23, 26 e 29 dias de gestação. O cultivo in vitro destas células será acompanhado, sendo realizadas caracterizações morfológicas, imunofenotípicas, marcações específicas de células germinativas e de viabilidade celular. Sendo constatada a janela temporal na qual as possíveis células germinativas serão derivadas e cultivadas com sucesso, análises epigenéticas de metilação de DNA e acetilação de histonas serão conduzidas para a caracterização da reprogramação epigenética tempo-dependente na espécie canina. Espera-se que ao final deste estudo os mecanismos que compreendem a reprogramação das células germinativas caninas sejam melhor elucidados, levando a uma maior compreensão sobre possíveis biotécnicas a serem utilizadas na espécie canina.