Screening e caracterização de reguladores de Dicer em C. elegans

Resumo

Nós estamos envelhecendo mais rápido do que nunca antes, tanto que em 2050 é esperado que 22% da população mundial seja composta por pessoas acima de 60 anos. Por isso, hoje mais do que nunca, é importante entender como longevidade e envelhecimento são controlados. Nesse contexto, a via de processamento de miRNA é relevante, pois uma das enzimas que participa nessa via - Dicer - foi descrita por vários estudos como um componente chave no controle do processo de envelhecimento. Dicer e os níveis globais de miRNAs diminuem com o envelhecimento no tecido adiposo de camundongos e em C. elegans, enquanto o nocaute de Dicer específico para o tecido adiposo de camundongos e para C. elegans resultam em envelhecimento acelerado. Reciprocamente, Dicer está relacionada ao aparecimento de doenças metabólicas, tais como diabetes, obesidade e lipodistrofia, da mesma forma que também está relacionada a diferentes tipos de câncer. Para compreender melhor como Dicer é regulada, nós propomos um screen genômico para novos reguladores de Dicer baseado em forwards genetics. Para tanto nós pretendemos screenar um C. elegans transgênico que seja livre de limitações comumente observadas, tais como inibição por transgene e falta de elementos regulatórios endógenos (por exemplo, 5'- e 3'-UTRs). Por fim, para obter dados representativos e em larga escala, nós pretendemos utilizar o biosorter COPAS, o qual não está disponível em nenhum país da América Latina, para separar vermes com expressão diferencial de Dicer de uma maneira rápida, eficiente e imparcial. Seguirão então a caracterização e validação dos alvos identificados. Com isso, esperamos gerar dados valiosos que irão nos ajudar a entender como Dicer é regulada e como pode ser modulada para retardar o envelhecimento. (AU)