Carcinoma papilífero da tiroide: expressão de proteínas que participam de uma poss...
- Auxílios pontuais (curta duração)
Resumo
O objetivo final deste projeto é responder dois problemas clínicos importantes relacionados aos tumores da tiróide. O primeiro deles é a alta prevalência de nódulos não-palpáveis que são detectados em uma prevalência de aproximadamente 50% na população. Uma vez detectado um nódulo, é fundamental um diagnóstico preciso, uma vez que este determinará o tratamento adequado. Atualmente a punção por agulha fina (PAAF) é a melhor ferramenta não-cirúrgica para avaliar os nódulos tiroidianos. Entretanto, 30% das PAAFs resultam em nódulos diagnosticados como suspeito e pacientes são submetidos à cirurgia para um diagnóstico mais preciso. Com o objetivo de resolver este problema, iniciamos a investigação do perfil de expressão gênica de uma lesão benigna (adenoma folicular) e de uma lesão maligna (carcinoma folicular). A análise realizada usando Serial Analysis of Gene Expression (SAGE) e subseqüente validação dos genes candidatos por PCR em tempo real qPCR) e imuno-istoquímica (IHQ) permitiram identificar quatro novos marcadores (DDIT3, ARG2, ITM1 e Clorf24) e a combinação da expressão destes genes resultou na diferenciação das lesões benignas das malignas com uma precisão de .83. Anticorpos comerciais para DDIT3 e ARG2 foram utilizados na validação por IHQ. Sensibilidade e especificidade foram 90% e 85,2% para cada anticorpo. A análise em combinação não aumenta a acurácia do teste. Aqui propomos aumentar a especificidade e sensibilidade deste teste. Nossa hipótese é que a realização de biblioteca SAGE dos falso-positivos e falso-negativos permitirá identificar novos genes que poderão aumentar a acurácia do teste. Além disso, propomos investigar a expressão destes novos marcadores nas outras lesões da tireóide, a função de dois marcadores (ITMl e Clorf24) nas células foliculares da tiróide e, por fim, avaliar a eficiência destes marcadores em diferenciar os nódulos benignos dos malignos no material obtido da PAAF. O sucesso destes projetos permitirá o desenvolvimento de um novo e mais acurado teste que poderá não só auxiliar o diagnóstico pré-cirúrgico de pacientes com nódulos tiroidianos. O segundo problema clínico é que a recorrência dos tumores da tiróide é alta, ocorrendo em 40% dos pacientes com carcinoma bem diferenciado. Metástase para linfonodo é responsável por 60-75% das recorrências regionais. Uma parte deste projeto propõe identificar genes associados à metástase para linfonodo. Embora muito se sabe sobre a patogênese dos tumores tiroidianos, o processo de metástase ainda é pobremente conhecido. Através da caracterização do perfil de expressão gênica de um tecido normal, tecido derivado de carcinoma papilífero da tiróide e na metástase para linfonodo do mesmo paciente poderemos identificar genes associados ao processo de metástase do carcinoma papilífero da tiróide. Acreditamos que além de identificar genes candidatos ao envolvimento no processo metastático, esta análise poderá identificar genes que pedem ser usados no seguimento de pacientes com câncer de tiróide e ainda revelar novos alvos terapêuticos. (AU)