Uso de técnicas proteômicas para o estudo da acetilação de proteínas via radicalar desencadeada pelos produtos da reação diacetil/peroxinitrito

• Processo: 12/02514-9
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2012
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2014
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Metabolismo e Bioenergética
• Pesquisador responsável: Nilson Antonio de Assunção
• Beneficiário: Nilson Antonio de Assunção
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Ambientais, Químicas e Farmacêuticas (ICAQF). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus Diadema. Diadema , SP, Brasil
• Assunto(s): Proteínas Acetilação
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Acetilação de proteínas | Biacetil | Espectrometria de massas | Estresse oxidativo | metabolismo | química de proteínas

Resumo

Este projeto visa utilizar ferramentas bioanalíticas no estudo da acetilação de proteínas via mecanismo radicalar. O ânion superóxido, gerado no estresse oxidativo, reage com o óxido nítrico produzindo o peroxinitrito, que combinado com o diacetil origina espécies radicalares capazes de acetilar as proteínas e as bases nitrogenadas, cujo mecanismo foi demonstrado em um estudo in vitro. A exposição ao diacetil é associada a diversos tipos de doenças, principalmente as pulmonares. A acetilação radicalar não controlada pode provocar a alteração da função das proteínas e erros no processamento da informação genética, ocasionando doenças e mutações. O propósito do trabalho é verificar se a reação peroxinitrito/diacetil produz a acetilação via radicalar in vivo e, posteriormente, avaliar como essas alterações influem na expressão proteômica no tecido pulmonar de ratos Wistar. Os animais serão divididos nos seguintes grupos: i) controle que receberá o veículo, ii) somente peroxinitrito; iii) diacetil marcado com 13C; iv) peroxinitrito e diacetil marcado 13C. Os metabólitos e as proteínas de cada grupo serão analisados por eletroforese capilar, eletroforese em gel bidimensional, cromatografia líquida, western blot e espectrometria de massas para a separação e identificação das proteínas e das posições das acetilações. Esperamos contribuir para responder algumas questões biologicamente relevantes propondo um mecanismo não enzimático para a acetilação de proteínas e relacionando-o com a expressão proteômica na situação de estresse oxidativo e exposição ao diacetil. As respostas obtidas contribuirão para o entendimento dos mecanismos de acetilação não genéticos fornecendo insights para o estudo de doenças; a relação delas com a exposição ao diacetil e a necessidade de controlar o seu uso em alimentos. (AU)

Publicações científicas

(10)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

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LIMA JEDLICKA, LETICIA DIAS; SILVA, JUCIARA DA COSTA; BALBINO, ALEKSANDRO MARTINS; NETO, GIUSEPPE BRUNO; SOUSA FURTADO, DANIELLE ZILDEANA; TORRES DA SILVA, HERON DOMINGUEZ; CORREIA CAVALCANTI, FERNANDADE BARROS; VAN DER HEIJDEN, KARIN MARIE; AVELLANEDA PENATTI, CARLOS ALBERTO; HENRIQUES BECHARA, ETELVINO JOSE; et al. Effects of Diacetyl Flavoring Exposure in Mice Metabolism. BIOMED RESEARCH INTERNATIONAL, v. 2018, p. 11-pg., 2018-01-01. (13/07763-0, 18/02385-0, 12/02514-9)