IL-17 Induction by ArtinM is Due to Stimulation of IL-23 and IL-1 Release and/or Interaction with CD3 in CD4+ T Cells

• Processo: 16/04651-4
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Publicações científicas - Artigo
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2016
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2016
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Celular
• Pesquisador responsável: Maria Cristina Roque Antunes Barreira
• Beneficiário: Maria Cristina Roque Antunes Barreira
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 13/04088-0 - Lectinas de patógenos, AP.TEM
• Assunto(s): Imunoquímica Imunomodulação ArtinM Interleucina-17
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: ArtinM | CD4+ T cells | Il-17 | Il-23 | immunomodulation | Imunoquímica

Resumo

ArtinM é uma lectina ligante D-mannose, extraída da semente de Artocarpus heterophyllus, que interage com N-glicanas de TLR2 promovendo a ativação de células apresentadoras de antígenos (APCs), como manifestada pela produção de IL-12. Administração de ArtinM in vivo induz a imunidade de perfil Th1 e confere proteção contra infecção por patógenos intracelulares. No modelo murino de infecção por Candida albicans, foi verificado que em adição a Th1, ArtinM induz perfil Th17 manifestado pelos altos níveis de IL-17 nos animais tratados. Investigamos os mecanismos responsáveis pela produção de IL-17 induzida por ArtinM. Demonstramos que ArtinM estimula a produção de IL-17 por células esplênicas de camundongos BALB/c ou C57BL/6, uma resposta que foi significativamente reduzida na ausência de IL-23, Myd88, ou IL-1R. Além disso, mostramos que ArtinM induz diretamente a expressão de IL-23 e a produção de IL-1 por macrófagos. Consistentemente, na suspensão de células depletadas de macrófagos, a produção de IL-17 estimulada por ArtinM foi reduzida em 53% e a adição de IL-23 exógeno atua sinergisticamente com ArtinM na produção de IL-17 por suspensão de células esplênicas. Verificamos que a ausência de IL-23, IL-1R, ou MyD88 inibe, mas não bloqueia, a produção de IL-17 por células esplênicas estimuladas com ArtinM. Assim, investigamos se ArtinM exerce um efeito direto em células T CD4 na produção de IL-17. Foi constatado, suspensão de células esplênicas depletadas de células T CD4 respondem ao estímulo com ArtinM com baixo níveis de IL-17. Além disso, células T CD4 sobre estímulo com ArtinM elevou a expressão de TGF-B e liberou altos níveis de IL-17. Considerando o sinergismos observado entre IL-23 e ArtinM, utilizamos células oriundas de camundongos IL-23KO para ensaiar o efeito direto de ArtinM em células T CD4. Verificamos que ArtinM elevou significativamente a produção de IL-17, uma resposta que foi inibida quando as células T CD4 foram preincubadas com anticorpos anti-CD3. Em conclusão, ArtinM estimula a produção de IL-17 por células T CD4 de duas maneiras: (I) através da indução de IL-23 e IL-1 por APCs e (II) através da interação direta com CD3 em células T CD4. Este estudo contribui para elucidar os mecanismos responsáveis pela propriedade de ArtinM na indução de imunidade Th17 e cria novas perspectivas no delineamento de estratégias para modular a resposta imune através de agentes que reconhecem carboidratos. (AU)