Vias de sinalização envolvidas na interação de Trypanosoma cruzi com matriz extracelular proveniente de diferentes linhagens celulares

• Processo: 17/19854-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2017
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2020
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Bioquímica de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Maria Julia Manso Alves
• Beneficiário: Maria Julia Manso Alves
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Walter Colli
• Auxílio(s) vinculado(s): 20/08437-2 - Mudanças nos níveis de nitração e perfil de ligação de histonas ao DNA de Trypanosoma cruzi induzidas pela incubação com a matriz extracelular, PUB.ART; 19/02990-4 - Reprogramação do metabolismo de Trypanosoma cruzi resultante da incubação do parasita com a matriz extracelular do hospedeiro, PUB.ART
• Assunto(s): Matriz extracelular Transdução de sinais Fosforilação de proteínas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: fosforilação de proteínas | matriz extracelular | sinalização celular | S-nitrosilação de proteínas | Interação hospedeiro parasita

Resumo

Nosso grupo mostrou que a adesão de formas tripomastigotas de Trypanosoma cruzi à matriz extracelular (ECM), etapa importante na invasão da célula hospedeira pelo parasita, leva a modificações pós-traducionais de proteínas do parasita. Os dados de estudos proteômicos confirmaram a fosforilação ou a S-nitrosilação de proteínas de vias metabólicas, citoesqueleto, fosfatases, quinases, e proteínas ribossomais em formas tripomastigotas incubadas com ECM comercial. Os dados apontam para o papel de diferentes quinases no processo de adesão à ECM, de aumento de síntese de algumas proteínas como, por exemplo, as da família gp85/transialidase envolvidas na invasão do parasita e de redução de enzimas da via glicolítica. As vias de sinalização desencadeadas em T. cruzi pela adesão à ECM serão estudadas medindo-se ao longo do tempo a produção de NO, cGMP, cAMP e a atividade de quinases (AMPK, PKA, MAPK, GSK-3 e PIK3) na presença de inibidores de NO sintase, fosfodiesterase e quinases. O possível papel de AMPK no metabolismo de carboidratos será verificado pelo transporte celular de glicose. Em cada caso, será analisado o perfil geral das modificações das proteínas por S-nitrosilação e fosforilação. As ECMs de três linhagens celulares previamente selecionadas por sua capacidade diferencial de adesão ou infecção por T. cruzi serão estudadas por análise proteômica quanto à sua composição, assim como será examinada a ativação ou inibição das vias de sinalização por elas desencadeadas no parasita. Para confirmar a função biológica de alguns dados do proteoma/S-nitrosilproteoma obtidos no projeto anterior, pretende-se continuar os estudos com a paraflagellar rod (PAR), proteína flagelar, que tem 3 cisteínas modificadas por S-nitrosilação, além de outras descritas na literatura. Serão estudados os níveis de síntese proteica dessa proteína e determinada a cinética das modificações pós-traducionais (S-nitrosilação, sumoilação e ubiquitinação) produzidas pela incubação com ECMs. Pretende-se com este projeto ampliar o conhecimento da sinalização envolvida na adesão de formas tripomastigotas a ECMs, uma das etapas determinantes na disseminação do T. cruzi no hospedeiro. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

COUTINHO, JOAO V. P.; ROSA-FERNANDES, LIVIA; MULE, SIMON NGAO; DE OLIVEIRA, GILBERTO SANTOS; MANCHOLA, NUBIA CAROLINA; SANTIAGO, VERONICA FEIJOLI; COLLI, WALTER; WRENGER, CARSTEN; MANSO ALVES, MARIA JULIA; PALMISANO, GIUSEPPE. The thermal proteome stability profile of Trypanosoma cruzi in epimastigote and trypomastigote life stages. JOURNAL OF PROTEOMICS, v. 248, SEP 30 2021. (18/13283-4, 18/15549-1, 14/06863-3, 17/03966-4, 15/26722-8, 17/19854-0, 17/04032-5, 18/18257-1)