Caracterização da expressão de MELK pôr células epiteliais prostáticas normais (RWPE-1) e tumorais (LNCaP e PC3) em diferentes condições de cultura

• Processo: 15/09947-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Vigência (Início): 01 de agosto de 2015
• Vigência (Término): 31 de julho de 2016
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
• Pesquisador responsável: Sérgio Luis Felisbino
• Beneficiário: Nicolly Cezar Cruz
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Biologia celular Neoplasias da próstata Cultura de células Expressão gênica Células epiteliais Próstata Transdução de sinais Análise de sequência de RNA Reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa quantitativa (qRT-PCR)
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: cultura de células | LNCaP | Próstata | sinalização celular | câncer de próstata

Resumo

O câncer de próstata (CaP) é o segundo mais frequente e o segundo de maior taxa de morbidade e mortalidade entre os homens. A partir de análises de sequenciamento de RNAs de câncer de próstata de dois modelos murinos (projeto em andamento) e o cruzamento destes dados com dados publicados para o câncer de próstata humano, nosso grupo identificou a enzima serina/treonina kinase MELK (Maternal Embryonic Leucine zipper Kinase) como importante alvo terapêutico para o câncer de próstata. O objetivo deste projeto é caracterizar o padrão de expressão gênica da MELK em três linhagens de células epiteliais prostáticas RWPE-1, LNCaP e PC3 e em diferentes condições de cultura celular. Estas três linhagens celulares serão cultivadas nos seus respectivos meios de cultura, nos quais serão adicionados ou não testosterona, flutamida e fibronectina, separadamente. As células serão coletadas após 24 horas de tratamentos. A expressão proteica da MELK será feita por imunocitoquímica fluorescente em microscópio confocal e a expressão gênica por qPCR. Estes resultados irão revelar como a a regulação androgênica e a ancoragem com a matriz interfere com expressão de MELK por estas células e fornecerão bases para outros estudos funcionais com inibidores sintéticos e por RNAs de interferência. Desta forma, espera-se contribuir para a avaliação da MELK como potencial alvo terapêutico para o seu tratamento do Câncer de Próstata, principalmente no estágio resistente à castração.