Avaliação do papel funcional de proteínas de superfície de Leptospira interrogans como receptores de células endoteliais e epiteliais do hospedeiro

• Processo: 17/26223-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2018
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2023
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Ana Lucia Tabet Oller do Nascimento
• Beneficiário: Maria Beatriz Takahashi
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 14/50981-0 - Busca de proteínas de superfície nas sequências do genoma da Leptospira interrogans: caracterização funcional e imunológica para o entendimento de mecanismos envolvidos na patogênese de bactéria, AP.TEM
• Assunto(s): Interações hospedeiro-parasita Leptospira interrogans Leptospirose Células endoteliais Células epiteliais Cromatografia de afinidade Dicroísmo circular ELISA em animal
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Interação patógeno-hospedeiro | Leptospira interrogans | leptospirose | Interação patógeno-hospedeiro

Resumo

A Leptospirose é uma zoonose amplamente disseminada e ocorre de forma endêmica em várias partes do mundo. No Brasil, as epidemias mais frequentes ocorrem nas comunidades pobres durante o período de chuvas, época em que os alagamentos constantes associados às condições precárias de saneamento favorecem o contato com ambiente e água contaminada. Medidas para controlar a propagação da doença são falhos. O entendimento dos mecanismos de patogenicidade das leptospiras é fundamental para bloquear a ação deste patógeno. Nesse sentido, a identificação de proteínas da membrana externa conservadas são os principais alvos de pesquisa, visto que essa localização de superfície facilita a interação com o hospedeiro. Diversos estudos têm buscado caracterizar o envolvimento de proteínas de superfície de Leptospira interrogans com componentes do hospedeiro. Assim, o projeto atual tem como proposta avaliar o envolvimento das proteínas LipL41, LipL21, Lip46 e OmpL37 como receptores de células endoteliais e epiteliais in vitro. Os genes clonados serão expressos em linhagens de E. coli. As proteínas recombinantes serão purificadas por cromatografia de afinidade a metal e analisadas quanto a sua estrutura pela técnica de dicroísmo circular. Animais BALB/c serão imunizados com as proteínas recombinantes para produção de antissoro policlonal e os soros obtidos serão titulados por ELISA. Em seguida, as proteínas recombinantes serão avaliadas quanto à reatividade com anticorpos presentes nos soros de pacientes diagnosticados com Leptospirose e suas interações com células endoteliais e epiteliais serão caracterizadas in vitro. O cumprimento dessas etapas experimentais irá contribuir para a identificação de proteínas envolvidas na interação patógeno-hospedeiro. (AU)

Publicações científicas

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(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

TEIXEIRA, ALINE F.; FERNANDES, V, LUIS G.; CAVENAGUE, MARIA F.; TAKAHASHI, MARIA B.; SANTOS, JADEMILSON C.; PASSALIA, FELIPE J.; DAROZ, BRENDA B.; KOCHI, LEANDRO T.; VIEIRA, MONICA L.; NASCIMENTO, ANA L. T. O.. Adjuvanted leptospiral vaccines: Challenges and future development of new leptospirosis vaccines. Vaccine, v. 37, n. 30, p. 3961-3973, JUL 9 2019. (17/01411-5, 17/06731-8, 17/25167-6, 14/50981-0, 17/01102-2, 16/11541-0, 17/26223-7, 17/00236-5, 16/01384-5)

TAKAHASHI, M. B.; TEIXEIRA, A. F.; ALTO, NASCIMENTO. The leptospiral LipL21 and LipL41 proteins exhibit a broad spectrum of interactions with host cell components. VIRULENCE, v. 12, n. 1, p. 2798-2813, DEC 31 2021. (17/26223-7, 19/17488-2, 17/00236-5)

TAKAHASHI, MARIA BEATRIZ; TEIXEIRA, ALINE FLORENCIO; NASCIMENTO, ANA LUCIA TABET OLLER. Overcoming problems to produce the recombinant protein LipL21 of Leptospira interrogans. BIOTECHNIQUES, v. N/A, p. 6-pg., 2023-04-17. (14/50981-0, 19/17488-2, 17/26223-7, 16/11541-0)

DAROZ, BRENDA B.; FERNANDES, LUIS G. V.; CAVENAGUE, MARIA F.; KOCHI, LEANDRO T.; PASSALIA, FELIPE J.; TAKAHASHI, MARIA B.; NASCIMENTO FILHO, EDSON G.; TEIXEIRA, ALINE F.; NASCIMENTO, ANA L. T. O.. A Review on Host-Leptospira Interactions: What We Know and Future Expectations. FRONTIERS IN CELLULAR AND INFECTION MICROBIOLOGY, v. 11, p. 13-pg., 2021-11-25. (18/06201-1, 18/08131-0, 17/01102-2, 17/26223-7, 16/11541-0, 18/09652-4, 18/21959-8, 19/17488-2, 17/06731-8)