Avaliação do papel de duas proteínas de Leptospira interrogans na patogencidade e na atividade de imunoproteção em modelo animal

• Processo: 22/08985-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2022
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Ana Lucia Tabet Oller do Nascimento
• Beneficiário: Igor Rodolpho Matheus Silva
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 19/17488-2 - Avançando no entendimento da patogenicidade e virulência da Leptospira interrogans através de análises proteômicas, estruturais, mutagênicas e imunológicas, AP.TEM
• Assunto(s): Interações hospedeiro-patógeno Leptospira interrogans Leptospirose Virulência Vacinologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Leptospira interrogans | leptospirose | Patogenicidade | vacinologia reversa | Interação patógeno/hospedeiro

Resumo

A leptospirose é uma zoonose mundialmente disseminada causada por espiroquetas patogênicas do gênero Leptospira. A doença acomete humanos e animais. Nos centros urbanos, os ratos são os disseminadores da leptospirose pois albergam as bactérias nos rins, excretando-as vivas continuamente contaminando água e solo. No Brasil, as epidemias mais frequentes ocorrem durante o período de chuvas, época de alagamentos que associado às condições precárias de saneamento favorecem o contato com ambiente contaminado. O entendimento dos mecanismos de patogenicidade das leptospiras é fundamental para bloquear a ação deste patógeno. Nesse sentido, a identificação de proteínas da membrana externa conservadas são os principais alvos de pesquisa, visto que essa localização de superfície facilita a interação com o hospedeiro. Neste sentido, o projeto tem como objetivo caracterizar o envolvimento de 2 proteínas de superfície de Leptospira interrogans, LIC11664 e LIC10499, suas interações à células endoteliais e epiteliais em cultura, bem como a componentes do hospedeiro. As sequencias codificadoras terão seus genes clonados e expressos em linhagens de E. coli. As proteínas recombinantes serão purificadas por cromatografia de afinidade a metal e analisadas quanto a sua estrutura pela técnica de dicroísmo circular. Animais BALB/c serão imunizados com as proteínas recombinantes para produção de antissoro policlonal e os soros obtidos serão usados em diversos experimentos para sondar a presença destas proteínas. Estas, na sua forma recombinante, serão avaliadas quanto à reatividade a componentes do hospedeiro, como matriz extracelular e do plasma, como plasminogênio e fibrinogênio, e componentes do sistema complemento. As proteínas serão analisadas quanto a interações com células endoteliais e epiteliais em cultura e quanto as atividades de imunoproteção em modelo animal. Estas atividades serão validadas com a obtenção de mutantes de leptospiras saprófitas e patogênicas. Estes resultados caracterizarão estas proteínas quanto ao papel na patogenicidade das leptospiras e quanto o potencial para o desenvolvimento de vacinas. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

SILVA, IGOR R. M.; TAKAHASHI, MARIA B.; TEIXEIRA, ALINE F.; NASCIMENTO, ANA L. T. O.. Evaluation of binding activities of a putative lipoprotein LIC_13355 of Leptospira spp.. FEBS OPEN BIO, v. N/A, p. 15-pg., 2024-12-12. (19/17488-2, 22/08985-5, 17/26223-7, 16/11541-0, 19/05466-4)