Biologia molecular dos sistemas renina-angiotensina e calicreínas cininas

Resumo

Os sistemas renina-angiotensina (SRA) e calicreína-cininas (SCC), exercem papéis importantes na regulação de vários processos fisiológicos e patológicos relacionados ao controle da pressão arterial e também exercem efeitos sobre uma variedade de processos como a promoção de crescimento e hipertrofia celular, transmissão de dor e nos processos inflamatórios, entre outros.O principal efetor do SRA é a angiotensina II (Angll) e o do SCC são as cininas como a bradicinina (BK). Tanto as cininas como a Angll agem através da ativação de receptores acoplados a proteína G (GPCR): os receptores AT1 e AT2 (e seus sub-tipos) no caso da Angll, e os receptores B1 e B2 no caso das cininas. Pela sua importância nos processos fisiopatológicos envolvendo a regulação da pressão arterial, e pela grande homologia entre os seus receptores, esses dois sistemas têm sido objeto de estudos de nossos laboratórios, envolvendo a modelagem molecular e mutações sítio-dirigidas dos receptores, estudos conformacionais de peptídios sintéticos representativos de sequências do receptor AT1 e sua interação com membranas, e diversos aspectos da biologia molecular dos dois sistemas. O presente projeto se propõe a dar continuidade a esses estudos através da investigação dos vários temas relacionados abaixo. A) Relações entre estrutura e atividade do receptor AT1 de angiotensina: I. modelagem de Receptores Acoplados a Proteína G; II. propriedades conformacionais de peptídios contendo sequências de GPCRs e de proteína G; III. estudo mutacional do mecanismo da transdução do sinal no receptor AT 1; IV. requisitos estruturais para a dimerização do receptor A T 1; V. processamento do complexo Angll-receptor AT 1; VI. síntese e correlação estrutura-atividade biológica de análogos da Ang II e da BK em solução e em presença de membranas modelo; VII. papel das regiões não traduzidas do gene do AT1 na regulação funcional do receptor. B) Biologia molecular do sistema calicreína-cininas; VIII. estudo da regulação da expressão do gene da carboxipeptidase M humana; IX. Geração de ratos transgênicos com superexpressão do receptor B2 de bradicinina no coração; X. geração e caracterização de camundongos transgênicos com superexpressão do receptor B1 de cininas no endotélio; C) papel do SCC em processos patológicos; XI. papel do sistema calicreína-cinina no desenvolvimento de câncer de mama e implicações no processo de angiogênese; XII. importância do sistema calicreína-cininas na gênese e manutenção do choque endotóxico; D) desenvolvimento de antagonistas para receptores da Angll e BKXIII. Desenvolvimento de antagonistas dos receptores B1 e B2 das cininas e AT1 da angiotensina utilizando SELEX; XIV. identificação de mutações no gene do receptor B1 das cininas e seu papel na obesidade. (AU)