Mutações novas em genes esteroidogênicos e suas alterações na atividade enzimática

Resumo

A hiperplasia congênita da adrenal é uma desordem autossômica recessiva caracterizada por erros inatos da esteroidogênese. A deficiência da 21-OH e da 11b-OH são as formas mais comumente encontradas, 90% e 5-8% dos casos, respectivamente. Análises moleculares têm sido realizadas para o rastreamento de mutações nos genes CYP21 e CYP11B1. Trabalhos desenvolvidos em nosso laboratório, possibilitaram o estudo de 102 famílias com pelo menos um indivíduo afetado com a forma clássica da doença, no caso da deficiência da 21-OH e 9 famílias no caso da 11b-OH. Foram encontradas nove novas mutações nesse estudo. Quatro mutações "missense" no gene CYP21 e uma no gene CYP11B1 foram determinadas. Apesar de considerarmos as mutações "missenses" como a causa da HCA nas famílias estudadas, é necessária a análise da expressão e da atividade da proteína mutante in vitro para a comprovação do envolvimento dessas mutações com o fenótipo afetado. Uma alteração do sítio de "splice" normal foi encontrada tanto em homozigose quanto em heterozigose em quatro pacientes não relacionados. Além' dessas, pretende-se avaliar a possibilidade de criação de um sítio de "splicing" alternativo no íntron 7 por uma alteração nucleotídica encontrada em uma paciente cujo fenótipo não condiz com o genótipo. Dessa forma, o presente projeto tem por objetivo clonar e expressar os genes mutantes CYP21 e CYP11B1 e avaliar as atividades das enzimas em suas formas mutantes. (AU)