Análise fosfo e glico proteômica diferencial em adenocarcinoma gástrico e sua eventual correlação com parâmetros clínico-patológicos de prognóstico

Resumo

O câncer gástrico é o quarto tipo de câncer mais comum e a segunda maior causa de morte por câncer no mundo. Atualmente, o Brasil situa-se em quarto lugar quanto à maior prevalência na América Latina e o Estado do Pará apresenta elevada incidência dessa neoplasia. O conhecimento da carcinogênese gástrica ainda é fragmentado. A modificação desse panorama pode depender da identificação de alterações protéicas envolvidas no desenvolvimento tumoral, o que permitiria determinar de modo mais preciso o prognóstico, o diagnóstico e o estabelecimento de uma conduta terapêutica. Pouco se conhece sobre o perfil de expressão protéica e os perfis de glicosilação e fosforilação de proteínas em amostras de câncer gástrico primário. No presente estudo, os perfis de expressão protéica, de glicosilação e de fosforilação serão estabelecidos em 24 amostras de câncer gástrico e 24 de tecido gástrico normal. Para estabelecer o perfil de expressão protéica, as amostras serão separadas por eletroforese em gel bidimensional, e as proteínas sub ou superexpressas serão identificadas por espectrometria de massa. Os perfis de glicosilação e fosforilação serão estabelecidos utilizando-se Pro-Q® Emerald 300 glycoprotein stain e Pro-Q® Diamond Phosphoprotein Gel Stain respectivamente. As proteínas com diferença no padrão de glicosilação e no padrão de fosforilação serão identificadas por espectometria de massa. Esses perfis serão comparados considerando-se a presença ou a ausência de neoplasia, a presença ou a ausência de Helicobacter pylori, o estádio clínico, o tipo de adenocarcinoma gástrico e seu grau de diferenciação, bem como a presença ou a ausência de metástase em linfonodos. Proteínas encontradas com superexpressão nas amostras neoplásicas serão também avaliadas por Western Blotting em 50 amostras de soro de pacientes com neoplasia gástrica e de 50 de voluntários, visando estabelecer a eventual presença de marcadores diagnósticos circulantes e, portanto, menos invasivos. Todas as amostras serão obtidas no Hospital Universitário João de Barros Barreto do Estado do Pará. O projeto irá gerar novas e incrementais informações biológicas que possibilitarão melhor compreensão etio e fisiopatológica dessa neoplasia, com potencial uso terapeutico.