Microbiota dos canais radiculares de dentes com insucesso do tratamento endodôntico e análise da suscetibilidade antimicrobiana e dos fatores de virulência dos Enterococcus faecalis isolados

Resumo

A microbiota dos canais obturados com lesão periapical apresenta-se resistente aos métodos de combate à infecção endodôntica. O conhecimento dos microrganismos associados ao insucesso endodôntico e suas características genotípicas e fenotípicas poderia nos levar a uma melhoria da terapêutica endodôntica, elevando assim a taxa de sucesso do retratamento. Este trabalho tem por objetivo identificar os microrganismos, principalmente Enterococcus spp., Staphylococcus spp., Candida spp. e enterobactérias na saliva, no material restaurador e nos canais radiculares de dentes indicados para o retratamento endodôntico. Verificará também a suscetibilidade antimicrobiana e os fatores de virulência das cepas de Enterococcus spp. isoladas dos canais radiculares. Serão utilizados meios de transporte, cultura e incubação que propiciam o crescimento de bactérias anaeróbias estritas, além de meios seletivos para auxiliar no isolamento de todas as possíveis espécies. As cepas de E. faecalis isoladas de canais radiculares serão testadas quanto à suscetibilidade antimicrobiana através do método do E-test, utilizando as seguintes substâncias: benzilpenicilina, penicilina V, amoxicilina, amoxicilina + ácido clavulânico, eritromicina, azitromicina, vancomicina, cloranfenicol, tetraciclina, doxiciclina, ciprofloxacin, moxifloxacin, vancomicina e rifampicina. Em especial, cepas de Enterococcus faecalis dos diferentes sítios da cavidade oral citados também serão testadas com método molecular (PCR), utilizando primers específicos para: E. faecalis e E. faechim. Reações de PCR também serão utilizadas para investigar determinantes virulentos nestas cepas de Enterococcus spp.. Nesse caso, o DNA será extraído das cepas cultivadas, e serão utilizados primers específicos para detectar: substância de agregação (asa e asa373); adesinas de superfície ou fator de aderência (ace e esp); ativador de citolosina (cylA) e gelatinase (gelE). A detecção das enzimas citolisina e gelatinas e também serão estudadas pelo método de hidrólise do agar sangue e do agar gelatina, respectivamente. (AU)