Estudo microbiológico e de endotoxinas em canais radiculares de dentes com necrose pulpar e lesão periapical e avaliação da atividade endotóxica de LPS isolados de canais radiculares infectados

Resumo

Bactérias e seus subprodutos desempenham um papel etiológico primário no desenvolvimento e na perpetuação das lesões periapicais. LPS, constituinte de parede celular de bactérias Gram-negativas, é um potente estimulador da resposta inata do sistema de defesa do hospedeiro, capaz de gerar danos teciduais e destruição óssea. Os objetivos do presente estudo são: 1) investigar a presença de anaeróbios estritos nos canais radiculares com necrose pulpar e presença de lesão periapical através da técnica clássica de cultura e molecular (PCR Simples); 2) investigar a presença das espécies de Fusobacterium mwleatum, Porphyromonas gingivalis e Prevotella intermedia através do método de PCR simples, comparando à identificação fenotípica; 3) avaliar o efeito do preparo químico-mecânico com NaOCl 2,5% e EDTA 17% na redução de LPS em canais radiculares de dentes infectados por necrose pulpar e presença de lesão periapical; 4) comparar in vitro a atividade endotóxica do LPS extraído das bactérias F. mwleatum, P. gingivalis e P. intermedia isoladas de canais radicítíares de dentes com necrose pulpar e lesão periapical através do método Limulus Amebocyte Lysates. Serão coletadas amostras microbiológicas e de endotoxinas de 15 dentes com necrose pulpar e lesão periapical antes e após o preparo químico-mecânico com NaOCl 2,5%. As amostras microbiológicas serão diluídas, plaqueadas e incubadas em anaerobiose. Colônias microbianas serão isoladas e identificadas. As amostras de endotoxinas serão armazenadas. Reação de PCR será realizada utilizando primers específicos. Para quantificação de endotoxinas e comparação in vitro da atividade biológica de LPS extraídos será utilizado método LAL (Kit QLC-1000). Os dados serão tabulados e estatisticamente analisados pelo SPSS for Windows. (AU)