Estudo da função de ANKHD1 na apoptose e sua interação com SIVA em células neoplásicas

Resumo

Importante passo para a compreensão dos processos fisiopatológicos das neoplasias é a identificação de genes ativamente expressos e das funções biológicas de cada proteína codificada por estes genes. A proteína Ankyrin Repeat Single KH Domain containing 1 (ANKHD1) foi inicialmente identificada, em humanos, em linhagem celular de adenocarcinoam de próstata, LNCaP. Recentemente, o nosso grupo de pesquisa identificou que ANKHD1 é uma proteína citoplasmática altamente expressa em linhagens de leucemias agudas humanas (KG-1, HEL, K562, NB4, HL-60, Jurkat, MOLT4, Raji, Daudi e Namalwa) e em amostras de 38 pacientes com diagnóstico de leucemia aguda, quando comparadas às células hematopoéticas normais. Adicionalmente, através de ensaio de duplo híbrido em levedura, identificamos a associação da ANKHD1 com a proteína pró-apoptótica SIVA. Estes dados sugerem que ANKHD1 pode estar envolvida em vias de sinalização de apoptose celular em neoplasias, de forma que os objetivos do presente trabalho são confirmar a interação protéica entre ANKHD1 e SIVA e estudar se ANKHD1 exerce uma função na apoptose celular em células leucêmicas (Jurkat) e em células de adenocarcinoma de próstata (LNCaP). A confirmação da interação entre ANKHD1 e SIVA será realizada através de hiperexpressão das mesmas em células HEK-293N e através de imunoprecipitação e imunoblotting da proteína endógena em células Jurkat e LNCaP. Ensaios funcionais para o estudo da ativação da apoptose celular serão realizados em células submetidas ou não a inibição da expressão de ANKHD1 através de RNAi. (AU)