Interações entre plaquetas de pacientes com anemia falciforme e culturas de células endoteliais humanas de cordão umbilical (HUVEC): avaliação in vitro da adesão de plaquetas e seu efeito na ativação endotelial

Resumo

A anemia falciforme (AF) é uma doença causada por uma mutação de ponto (troca do ácido glutâmico pela valina), que resulta numa hemoglobina anômala, a hemoglobina S (HbS). A principal causa de morbidade para os pacientes com AF são os eventos de vaso-oclusão, resultado da adesão anormal de células vermelhas e brancas para a parede vascular. Nossos dados sugerem que as plaquetas também participam desses eventos, pois observamos um aumento das suas propriedades adesivas com a maior expressão das moléculas de adesão GPIIb/IIIa e da P-selectina em plaquetas de pacientes com AF, indicando que a plaqueta contribua para o processo do vaso-oclusão. Além disso, a sinalização através da adenosina monofosfato cíclica (AMPc), nucleotídeo cíclico que inibe a ativação plaquetária, apresentou níveis reduzidos nas plaquetas de pacientes com AF, e o aumento da atividade da enzima fosfodiesterase 3A (PDE3A) que degrada AMPc, nas plaquetas desses pacientes. Portanto, o objetivo desse projeto de doutorado será avaliar a capacidade de plaquetas de pacientes com AF (plaquetas AF) de aderir para células endoteliais humanas de cordão umbilical (HUVEC) em cultura, através de ensaios de adesão in vitro. Além disso, a capacidade das plaquetas AF de ativar células endoteliais será avaliado. O efeito das plaquetas na liberação de mediadores inflamatórios por células endoteliais será verificado. A ativação e translocação do fator de transcrição endotelial, o NF-kB, e sua expressão gênica serão avaliados com a incubação de HUVEC na presença de plaquetas de pacientes com AF. Esses dados serão necessários para acrescentar e complementar os resultados já encontrados, que contribuirão para o melhor entendimento das plaquetas na fisiopatologia do processo do vaso-oclusão na anemia falciforme. (AU)