Análise dos fatores genéticos envolvidos no desenvolvimento da síndrome metabólica durante a terapia com glicocorticóide em pacientes portadores da deficiência da 21-hidroxilase

Resumo

A deficiência da 21-hidroxilase (21OHD) é um frequente erro herdado do metabolismo que resulta no comprometimento da síntese do cortisol e/ou aldosterona e no aumento da produção de andrógenos. A doença é caracterizada por uma diversidade fenotípica, variando desde virilização pré-natal da genitália externa de fetos femininos e pós-natal em ambos os sexos, com ou sem perda de sal, até quadros assintomáticos. Em seu tratamento é necessária reposição com glicocorticóide para se evitar a insuficiência adrenocortical e os sinais de virilização. Um fino ajuste na dose diária da medicação é necessário para obter bom controle hormonal, bem como evitar sub ou super tratamento, com o objetivo de preservar o potencial de estatura final e fertilidade. Entretanto, tem sido observado o desenvolvimento de obesidade e/ou síndrome metabólica durante a terapia destes pacientes; porém, a prevalência destas complicações ainda não é conhecida, bem como se estão associadas com a dose utilizada de glicocorticóide ou se existem fatores genéticos predisponentes. Uma vez que os glicocorticóides apresentam importante função na regulação da distribuição da gordura corporal e no desenvolvimento da síndrome metabólica, nossos objetivos são: 1) determinar a incidência de obesidade e de síndrome metabólica em pacientes com a forma clássica da deficiência da 21-hidroxilase em tratamento com glicocorticóide e correlacionar com a dose cumulativa total; 2) avaliar se existem fatores genéticos predisponentes através da determinação da distribuição alélica de genes envolvidos na ação e/ou metabolismo dos glicocorticóides (NR3C1, 11(3HSD1, CYP3A4, CYP3A7) em pacientes com a deficiência da 21-hidroxilase, com a síndrome metabólica e em indivíduos controles; 3) avaliar se o citocromo P4503A7, o qual se correlacionou com a menor dose de glicocorticóide durante a terapia com glicocorticóide, apresenta atividade de 21-hidroxilação extra-adrenal in vitro. Casuística: 100 pacientes 1 com a deficiência da 21 hidroxilase, 50 pacientes com síndrome metabólica e 50 controles. Metodologia: Serão analisados dados antropométricos e laboratoriais dos prontuários dos 3 grupos de indivíduos. Dos pacientes com a deficiência da 21-hidroxilase, também será analisada a dose total cumulativa utilizada de glicocorticóide. DNA genômico dos indivíduos serão extraídos de leucócitos periféricos, os genes acima citados serão amplificados por PCR, os produtos submetidos à reação de sequenciamento automático direto com o kit ABI Prism Big Dye Terminator Cycle Sequencing Ready Reaction (Applied Biosystems, Perkin-Elmer Corporation, Inc., Foster City, EUA) e à eletroforese capilar em sequenciador automático, ou também à digestão enzimática. A capacidade de 21-hidroxilação da enzima P4503A7 será avaliada através de sua expressão in vitro em E. coli, subseqüentes ensaios enzimáticos com 17OH-progesterona triciada e análise em cromatografia de camada fina. (AU)