Regulação da transativação e transrepressão gênica mediada por receptores nucleares

Resumo

Os mecanismos nos quais os organismos coordenam a sinalização hormonal com os efeitos do ambiente, embora não perfeitamente compreendidos, têm sido elucidados por estudos de muitos fatores de transcrição (FT), como os receptores nucleares (RNs). A regulação destas proteínas existe para promover um controle comum da expressão de genes em diferentes tecidos e etapas de desenvolvimento dos organismos.Os RNs estão intimamente relacionados a doenças como câncer, síndrome metabólica, diabetes, disfunções cardíacas e obesidade, atuando direta ou indiretamente na regulação da transcrição. Na regulação direta, ativam ou reprimem a expressão através de sua modulação por ligantes (transativação). O processo indireto (transrepressão) ocorre quando os RNs atuam sobre outros fatores de transcrição. Muitos estudos demonstram a participação direta de RNs no processo de transcrição; outros reportam a influência da interação RNs - FTs na regulação da expressão de diversas proteínas, em um processo chamado de transrepressão. Neste contexto, a importância de um melhor entendimento sobre possíveis interações entre RNs e outras proteínas, além dos mecanismos de transativação e transrepressão, fica evidente. Com isso, este projeto se propõe ao estudo das interações dos RNs e suas as sequências regulatórias de DNA (HREs); RNs e proteínas correguladoras; e RNs com outros fatores de transcrição. Estes estudos deverão ser realizados do ponto de vista bioquímico, biofísico e da biologia estrutural, através da utilização de técnicas de pull down, imunoprecipitação, PCR em tempo real, transativação de cultura de células, ensaios de afinidade, fluorescência, dicroísmo circular, espalhamento de Raios-X a baixos ângulos, espalhamento de luz, espectroscopia e cristalografia de proteínas. Os resultados gerados serão utilizados para o melhor esclarecimento das informações sobre os mecanismos de ação de RNs, permitindo que novos modelos de regulação do processo de transcrição gênica por eles mediados sejam propostos. Ou ainda, que os modelos já propostos sejam confirmados, porém, com um maior nível de detalhamento. (AU)