Pesquisa de mutações nos genes BMP15 e GDF9 em mulheres portadoras de insuficiência ovariana prematura: desenvolvimento de metodologia para estudo funcional das mutações em células humanas de granulosa imorta

Resumo

Recentes estudos in vivo e in vitro caracterizaram o papel de diversos genes na diferenciação das células germinativas e no desenvolvimento ovariano. Entre os genes envolvidos nesses processos estão os fatores de transformação do tipo (TGF-, BMP15 e GDF9). A sobrevivência dos oócitos, crucial para o desenvolvimento ovariano, é promovida pela diferenciação e proliferação das células da granulosa induzidas por esses fatores de transformação que por sua vez vão permitir a diferenciação e manutenção dos oócitos. A ausência desses fatores ou desregulação das vias que controlam a sobrevivência dos oócitos estão associados à insuficiência ovariana prematura (IOP), um distúrbio associado à infertilidade feminina que afeta de 1 a 2% das mulheres com menos de 40 anos. Mutações nos genes BMP15 e GDF9 foram identificadas na última década em mulheres com amenorréia primária ou secundária sendo que em alguns estudos a freqüência de mutações missense nesses genes chega a 15%, demonstrando sua importância na definição etiológica da falência ovariana primária. Em um recente trabalho desenvolvido por nosso grupo e colaboradores identificamos uma nova mutação nonsense no gene BMP15 em duas irmãs com amenorréia primária. Os estudos de outras mutações nesse gene in vitro previamente descritos, utilizaram uma linhagem celular tumoral, as quais perdem a expressão do receptor de LH. Nosso objetivo é desenvolver um novo sistema através da imortalização de células da granulosa provenientes de pacientes com infertilidade de origem masculina submetidas à fertilização in vitro. A utilização da tecnologia de imortalização pela introdução do gene da transcriptase reversa da telomerase humana (hTERT) proporcionará um sistema inédito de estudo in vitro para células da granulosa e contribuirá substancialmente para o conhecimento das causas genéticas da infertilidade feminina. (AU)